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不同处理牛卵丘颗粒细胞作为核供体对克隆胚发育的影响.pdf
畜牧兽医学报2009，40(5)：645—651
ActaVeterinariaetZootechnicaSinica
不同处理牛卵丘／颗粒细胞作为核供体对
克隆胚发育的影响
姚雅馨h2，李向臣2，张勇1，关伟军孙，马月辉2。
(1．甘肃农业大学动物医学院，兰州730070；
2．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，jE京100193)
A)、ROS(Roscovitine)、血清饥饿和接触抑制方法处理牛卵丘／颗粒细胞，
擒要：本研究利用TSA(Trichostatin
检测处理前后细胞乙酰化水平、周期分布及其对重组胚发育能力的影响，为提高核移植效率提供理论基础。分别
采用上述方法处理牛卵丘／颗粒细胞，首先对处理的细胞形态及活率进行观察，并利用流式分选技术检测处理细胞
的周期分布，再通过间接免疫荧光法检测经上述不同处理前后细胞乙酰化水平变化，最后以上述处理细胞作为核
供体构建重组胚，比较重组胚发育水平的不同。试验结果显示，经上述处理的卵丘／颗粒细胞形态良好，活率均保
持在94％以上；TSA处理卵丘／颗粒细胞后，其乙酰化水平较对照组和其他处理组明显增加(PO．05)。经ROS处
h后，细胞被明
处理的卵丘／颗粒细胞乙酰化水平较对照组明显降低(P0．05)；利用TSA处理卵丘／颗粒细胞24
显抑制在Go／G，期，且较其他处理组的抑制现象更加明显(Po．05)；并且，经TSA处理后的卵丘／颗粒细胞充当
(10．4士8．3)％)。经TSA处理的牛卵丘／颗粒细胞，与其他处理组相比，乙酰化水平较高，细胞形态良好，细胞周
期被明显抑制在G。／G-期，且获得了较高的卵裂率和囊胚率，作为供体细胞的处理方式较为适合。
关键词：牛；卵丘／颗粒细胞，乙酰化}克隆胚
中图分类号：s823；S814．8文献标识码：A 文章编号：0366—6964(2009)05—0645-07
EffectofDifferentTreatmentswithBovineCumulusCellsas
Donor
Cellson
Cloning
Embryos
YAOYa—xinl·2，LI un2’，MAYue-hui2’
Xiang—chen2，ZHANGYon91，GUANWei-j
Medicine，Gansu
(1．CollegeofVeterinary AgriculturalUniversity，
Lanzhou730070，China；2．InstituteAnimalScience，
of
Chinese ofAgricultural 100193，China)
Academy Sciences，Beijing
this cumuluscellsweredealedwithTrichostatin
Abstract：In
study，the
starvationandcontact detectthe oflevelof
(ROS)，serum inhibition，wechange acetylation，the
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