鸡致病性大肠杆菌油乳剂灭活苗的制备.PDF

殖与饲料2015 年第6 期 疫病防控 71 鸡致病性大肠杆菌油乳剂灭活苗的制备 卫 晓1 刘俊玲2 1.河南省济源市动物卫生监督所，河南济源 459000； 2.河南省洛阳高新区畜牧兽医防疫检疫中心，河南洛阳 471000 摘要 从一鸡场患病鸡体内分离出1 株鸡致病性大肠杆菌，将分离的菌株扩增、灭活，制备成油乳剂灭活 苗。对灭活苗进行物理性状、安全性、保护力等检验，确认合格后，对鸡场进行免疫，效果良好。该油乳剂灭活苗对 本场鸡有较好的保护作用。 关键词 鸡；大肠杆菌；致病性；灭活苗 禽大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的急 1.2 菌种鉴定 性或慢性传染病。各种禽类均易感，各个品种、日龄 1）形态特征。对分离到的菌株进行革兰氏染色 的鸡均可发病。随着养殖场户防疫意识的不断提 镜检。 高，诸如新城疫等病毒性疫病基本得到有效控制。 2 ）生化试验。对分离到的菌株进行生化试验， 与此同时，细菌性疫病却往往被忽略，特别是大肠 麦芽糖、甘露醇和蔗糖）发 包括五糖（葡萄糖、乳糖、 杆菌病的发生和流行有越发严重的 势，给养禽业 酵试验、M-R/V-P 试验、吲哚试验和三糖铁试验。 带来巨大损失，而大肠杆菌的血清型极多，我国已 3）致病性试验。将分离的菌株用普通肉汤培养 报道的鸡致病性血清型已有50 个，且各血清型之 基培养 24 h ，培养物接种于5 只成年小白鼠（腹腔 间没有或很少有交叉保护，给疫苗免疫带来一定困 ， ，另取 注射 0.5 mL/ 只）。同时 5 只成年小白鼠注射无 难，相比之下，利用本场病死禽制备灭活苗针对性 菌生理盐水作对照，观察菌株对小白鼠的致病性。 强，能得到较满意效果。 1.3 大肠杆菌油乳剂灭活疫苗的制备 1）菌株的培养。将分离的菌株接种于普通肉 1 材料与方法 汤，37 ℃培养 24 h ，计数板菌落计数，菌液含菌量 1.1 致病菌株 为1012 个/mL ，用灭菌生理盐水菌液做10 倍稀释， 某鸡场病死禽，典型包心、包肝变化。无菌采取 含菌量为百个每毫升。 病鸡肝脏，37 ℃麦康凯琼脂培养基上进行分离培 2 ）水相制备。取上述菌液192 mL ，逐级加入甲 养 16 h 后，挑取单个紫红色菌落，再次接种于麦康 醛， 甲醛终 度达到0.4％，37 ℃灭活48 h ，经无 ，经 。 凯琼脂培养基上 3 次纯化 菌检查合格后，加入吐温-80 8 mL，混匀即为水相。 ： 收稿日期 2015-04-28 ，男， 。 卫春晓 1987 年生，助理兽医师 地区放牧。严格做好检疫和消毒工作，定期用 10% 减少各种疫病的诱发因素。 石灰乳或5%漂白粉液对鸭舍、饲养场地、污染物及 3 ）制定科学的免疫程序，预防疫病发生。根据 粪便等进行喷洒消毒。 当地疫病流行情况，科学制定免疫程序，定期进行 2 ）加强饲养管理。在日粮 添加多种维生素和 免疫接种，预防疫病发生。 矿物质，以增强机体的免疫力。适度调整鸭群的饲