第08章(下)-化学物质的发育毒性和致畸作用案例.ppt

三段生殖毒性试验 生育力和早期胚胎发育毒性试验（一般生殖毒性试验） 胚体-胎体毒性试验(致畸试验) 出生前后发育毒性试验(围生期毒性试验) 三段生殖试验图解 Ⅰ. 生育力和早期胚胎发育毒性试验（一般生殖毒性试验） Ⅱ. 胚体-胎体毒性试验（致畸试验） Ⅲ. 出生前后发育毒性试验（围产期毒性试验） 二、人群流行病学研究 （一）人类证据的获得 流行病学调查：在接触外来化合物的人群中进行调查。调查的观察指标可参照有关的临床诊断检验指标，还可进行染色体畸变检查。 （二）发育毒性资料的使用 1、化学物致畸潜力分类和安全系数确定 2、ICH人类用药危险度分类 3、根据动物试验人群调查资料对致畸物分级 4、确认人类致畸物的标准 三、发育毒性的替代试验 （一）体外预筛试验 1、大鼠全胚胎培养 2、器官培养 3、胚胎细胞微团培养 4、小鼠胚胎干细胞试验 5、水螅培养 （二）体内预筛试验（C.K试验） 又名生殖／发育毒性筛选试验 依据：大多数出生前受到的损伤将在出生后表现为存活力下降和／或生长障碍。因此在仔鼠出生后，观察其外观畸形，胚胎致死，生长迟缓等发育毒性表现，而不进行传统常规试验中内脏和骨骼的检查，就可达到筛选的目的。 优点：所用动物少，检测终点少，实验周期短，能提供有关化学物对生殖和／或发育可能发生影响的初步信息。 1、化学物致畸潜力分类和安全系数确定 根据动物试验中发育毒性效应的类型、严重性和发生率将化学物分为四类，并规定各类型的不同的安全系数范围，用以评定待测物发育毒性的危险度。 国际生命科学院(International Life Sciences Institute,ILSI) 1989年提出 2、ICH人类用药危险度分类: ICH：人用药品注册技术要求国际协调会。 ICH 在研究设计中规定：被批准的新药要根据动物发育毒性的研究结果和从人类使用经验得到的信息，将该药品在妊娠用药类别中定位，并要求医生在开处方时遵守，以使怀孕妇女按规定使用这些药品。 A、B、C2：仅在如果明显地需要时，在怀孕期间可使用。 C1：仅在如果证明可能的效益与对胎儿的可能的危险比较是可 取时，在怀孕期间可使用。 D：如果在怀孕期间使用，应通知病人对胎儿可能的危害。 X：在怀孕或可能怀孕的妇女中禁止使用。 3、根据动物试验人群调查资料对致畸物分级 根据欧共体（EEC）和经济与发展组织（OECD）建议 4、确认人类致畸物的标准 (1)一种特殊的缺陷或几种缺陷并发(综合征)频率突然增加。 (2)缺陷的增加与某种已知的环境改变相交联，如一种新药的广泛使用巧合。 (3)已知在妊娠的特殊阶段暴露于接触环境的改变，产生有特征性缺陷的综合征。 (4)缺少妊娠时引起特征性缺陷婴儿产生的其他共同的因子。 已知的人类致畸物 电离辐射：放射治疗、放射性碘、原子武器 感染：风疹、巨细胞病毒、单纯性疱疹、梅毒、弓形体病毒 代谢失调：克汀病、糖尿病、苯丙酮酸尿、男性化肿瘤、高温 药物和化学品： 反应停、 Abameetin、 酒精、 氨基蝶呤、 雄性激素、麻醉剂、抗甲状腺药物、白消安、咖啡因、氯代联苯类、香豆素抗凝剂、环磷酰胺、二已基乙烯雌酚、敌螨普、三氟氯溴乙烷 、异维A酸、锂、甲巯咪唑、有机汞化合物、有机溶剂类、苯妥因、腐霉利、四环素、三甲恶唑烷二酮、丙(基)戊酸 1、生育力和早期胚胎发育毒性试验 （一般生殖毒性试验） 研究目的：评价化学毒物对配子发生和成熟、交配行为、生育力、胚体着床前和着床的影响。 实验动物：至少一种，首选大鼠。每组雌雄各16～20只（窝）。 给药时间：交配前雄性4周，雌性2周，交配期（2～3周），雌性着床前（大鼠孕6天）。 终末处理：雄性证实交配并使雌性受孕成功后处死，雌性在受孕13～15天终止妊娠。 观察指标 雄性：饮水量、摄食量、体重变化、睾丸、附睾重量及脏器系数、附睾精子计数、活动度和形态观察、生育率、睾丸附睾病理组织学检查； 雌性：饮水量、摄食量、体重变化、一般健康状况及死亡数、交配行为、受孕率、卵巢和子宫组织学检查； 孕鼠：妊娠体重变化，处死后检查黄体数、着床数、吸收胎、死胎和活胎数。 结果评定：F0代和F1代毒性及NOAEL，考虑各组受影响的窝数等。 2、胚体-胎体毒性试验 （致畸试验） 研究目的：评价母体自胚泡着床到硬腭闭合期间接触受试物对妊娠雌性和对胚体-胎体发育的有害影响。 实验动物：通常两种，啮齿类首选大鼠，非啮齿类可选家兔，每组雌雄各16～20只（窝）。 给