光学显微镜剖析.ppt

* 偏光显微镜（polarizingmicroscope） 偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质，在偏光显微镜下就能分辨的清楚。 （1）偏光显微镜的特点 将普通光改变为偏振光进行镜检的方法，以鉴别某一物质是单折射（各向同行）或双折射性（各向异性）。双折射性是晶体的基本特性。因此，偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域，在生物学和植物学也有应用。 （2）偏光显微镜的基本原理 偏光显微镜必须具备以下附件：起偏镜，检偏镜，补偿器或相位片，专用无应力物镜，旋转载物台等。偏光显微镜的原理比较复杂，主要是利用光的偏振性提高衬度。先用起偏器将入射光转变为偏振光。偏振光照到样品后偏振状态发生变化，然后通过检偏器观测，可以观测到样品的细节。为了调整光的偏振性，中间还需用到相位片或相位补偿器等。 第七节 衬度增强机制 第一章 光学显微镜 偏光显微镜图像 第七节 衬度增强机制 第一章 光学显微镜 原理： 斜射光照射到标本产生折射、衍射，光线通过物镜光密度梯度调节器产生不同阴影，从而使透明标本表面产生明暗差异，增加观察对比度。 特点： 1. 提高未染色标本的可见性和对比度 2. 图像显示阴影或近似三维结构而不会产生光晕 3. 可检测双折射物质（岩石、水晶、骨头等） 4. 可检测玻璃、塑料等培养皿中的细胞和组织 5. 聚光镜的工作距离可以设计得更长 6. 可以用于明场，暗场和荧光观察。 Hoffman调制衬度显微镜 第七节 衬度增强机制 第一章 光学显微镜 Hoffman调制衬度显微镜图像 第七节 衬度增强机制 第一章 光学显微镜 利用光的干涉产生的干涉条纹，观察和测定表面起伏和倾斜的显微镜。特别适合于观察薄膜的厚度。 原理：光的干涉现象 干涉显微镜 第七节 衬度增强机制 第一章 光学显微镜 微分干涉衬度显微镜 原理: 微分干涉衬度显微镜是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束。分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等，光束分别在距离很近的两点上通过被检物体，在相位上略有差别。由于两光束的裂距极小，而不出现重影现象，使图像呈现出立体的三维感觉。不同折射率不同高度产生衬度 应用：台阶与表面 检偏器 起偏器 渥氏棱镜 渥氏棱镜 样品 第七节 衬度增强机制：微分干涉显微镜 第一章 光学显微镜 应用结果例子 第一章 光学显微镜 第七节 衬度增强机制：荧光显微镜 利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像，在生物医学方面应用较多。 第一章 光学显微镜 第七节 衬度增强机制：荧光显微镜 荧光染料 第一章 光学显微镜 总结 分辨率限制 衬度增强方法 光学成像原理 显微镜结构 显微镜使用：调节，粗调，细调 高放大倍数情况下要注意！ 不同显微镜的主要应用： 1. 明场是显微镜观察用到最多的一种方式. 2. 暗场也叫超显微观察法,是因为他可以观察到在 明场下观察不到的细小颗粒等. 3. 偏光主要用于地质行业和化学高分子研究,在偏光下这些物质呈现不同的颜色. 4. 微分干涉会使你看到的画面出现类似浮雕的凹凸不平的图象,这样便于区分您要观察的不同部分. 5. 荧光主要用于生物镜 显微镜简称：BF：明场 DF：暗场 POL：偏光 DIC：微分干涉 FL：荧光 Nikon-L200A 常见光学显微镜 常见光学显微镜 谢 谢 ！ 第一部分 形貌分析 任何固体，首先遇到的问题是其形貌，对其研究是重要的。形貌有宏观和微观两种，在这一部分中，我们将对物体表面形貌的观察方法进行较为深入的探讨。讲述的主要内容为： 光学显微镜 电子显微镜 扫描探针显微镜 第一章 光学显微镜 第一节 引 言 1886年，Abbe设计高级消色差物镜， 无像差大NA物镜出现（ *NA 为数值孔径） 1893年，Kohler提出照明方式，充分利用Abbe 物镜的分辨率 在上述研究基础上，到19世纪末，光学显微镜得到了更新，出现了金相显微镜，双目显微镜等 *数值孔径(NA) 数值孔径简写NA，数值孔径是物镜和聚光镜的主要技术参数，是判断两者（尤其对物镜而言）性能高低的重要标志。其数值的大小，分别标刻在物镜和聚光镜的外壳上。它是物镜前透镜与被检物体之间介质的折射率（n）和孔径角（u）半数的正弦之乘积。用公式表示