附子、干姜、甘草的饮片炮制及质量标准.docx

附子、干姜、甘草的饮片炮制及质量标准研究 陆城宇，郭胤，白颖锋，高壮，刘鑫鹏（南京中医药大学药学院13中药1，江苏 南京） 摘要：目的 采用药典方法分别对四逆汤中药材进行炮制，研究炮制后其成分是否符合药典标准。 方法 蜜炙甘草、炮制淡附片。采用高效液相色谱法检测甘草中的甘草酸、甘草苷含量；附子中的双酯型生物碱：新乌头碱、次乌头碱和乌 头碱的总量、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱和苯甲酰次乌头原碱总量；结论 实验结果显示，炙甘草符合药典标准，而淡附片炮制不符合药典标准（双酯型生物碱含量过高） 关键词：四逆汤; 炮制; 甘草; 附子; 干姜; 质量标准; 四逆汤出自《伤寒论》，由附子、干姜、炙甘草组成，主治阳虚欲脱、冷汗自出、四肢厥逆、下利清谷、脉微欲绝，因其回阳温里祛寒之显效，被誉为回阳救逆第一方，现代临床常用于治疗冠心病心绞痛、心力衰竭、心肌梗等疾病，具有良好的治疗效果【1】。但临床使用皆为其炮制品，故而其炮制品质量的优劣需要评定，本实验旨在评价炮制方法的优劣，按照药典标准进行评定。 材料 AS20500A Ultrasonic Cleaner、TC-10K型电子天平、TD10002C型电子天平、Agilent 1100 Series、H1650-W高速离心机、HL-350A型高速多功能粉碎机、DHG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱、银利牌刀具、C21-SN216型电磁炉、FW80高速万能粉碎机、SHZ-DIII循环水真空泵、旋转蒸发器RE-2000A、FA1104电子分析天平、所需对照药品（如甘草苷、甘草酸铵等）。 炮制 甘草 取100g甘草，取炼蜜25g加适量凉开水稀释后，淋入净甘草片中拌匀， 闷润。置锅内，用文火加热，炒至老黄色，不黏手时，取出，晾凉。（每100kg 用蜜25kg），置鼓风干燥箱内干燥。 附子 取附子，大小个分开，用水浸泡至内无干心（本实验所采用炮制的乌头已经过水泡三天），取出，用电子天平秤取175g（相当于干品100g），与甘草、黑豆加水共煮透心，至切开后口尝无麻苦感时，取出，除去甘萆，黑豆， 切薄片（每100kg盐附子，用甘草5kg、黑豆10kg），置鼓风干燥箱中干燥（温度设置为80摄氏度）。 3 方法与结果 3.1 炙甘草中甘草苷、甘草酸铵含量的测定：从鼓风干燥箱中取出炙甘草，采用四分取样法取得样品10g，置入高速万能粉碎机中，打粉，过孔径0.355mm药典筛。 3.1.1 色谱条件及色谱使用性试验 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈 为流动相A，以 0.05% 磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为237nm。理论板数按甘草苷峰计算应不低于5000【2】。 INCLUDEPICTURE \d C:\\Users\\Administrator\\AppData\\Roaming\\Tencent\\Users\\1976750934\\QQ\\WinTemp\\RichOle\\FIW4GW02`QG13(8`K6_2)_2.png \* MERGEFORMATINET  3.1.2 供试品溶液的制备：取本品粉末约0.2g（精密称定为0.2040g）,置具塞 锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml,密塞,称定重量(187.17g)，超声处理(功 率250W，频率40kHz)30分钟，放冷，再称定重量,用70%乙酵补足减失的重 量，摇匀，滤过，取续滤液经高速离心4min，取上清液即得。 3.1.3 对照品溶液的制备：取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量,精密称加70%乙酵分别制成每lml含甘草苷20ug、甘草酸铵0.2mg的溶液，即(甘草酸重量=甘草酸铵重量 /1.0207)。 3.1.4 测定法：分别精密吸取供试品溶液10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。标准品溶液按照进样量1ul、2ul、10ul，采用外标两点作图法求得样品中的甘草酸和甘草苷的含量。 组别甘草苷（峰面积）甘草酸铵（峰面积）第一次进样164.21185.87第二次进样170.07185.63平均167.14185.75炙甘草中甘草苷、甘草酸铵峰面积 进样量 组别1ul2ul10ul甘草苷143.18237.731208.57甘草酸铵41.0278.10384.81对照品中甘草酸、甘草酸铵峰面积 甘草苷 甘草酸铵 3.1.5 甘草苷、甘草酸铵