三、定量分析方法的验证.ppt

药物分析教研室 Contents 特点： 灵敏度高，可达10-10～10-12g/ml 要求低浓度下测定 须做空白测定 荧光弱的药物可衍生化后测定 2.GC 第二节 定量分析方法的特点 示例 松节油的含量测定 照气相色谱法(附录Ⅵ E测定) 色谱条件与系统适用性试验 用聚乙二醇(PEG)-20M为固定相，涂布密度为20%；柱温为90°C。理论塔板数按α-蒎烯峰计算应低于1500。 校正因子测定 取正丁醇适量，精密称定，加石油醚(30～60°C)制成每1ml含20mg的溶液，作为内标溶液。另取α-蒎烯对照品约30mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加石油醚(30～60°C)至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，计算校正因子。 第二节 定量分析方法的特点 测定法 取本品约35mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用石油醚(30～60°C)溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，测定，即得。 本品含α-蒎烯(C10H16)不得少于70%。 第三节 药品分析方法的验证 药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则 药物稳定性试验指导原则 缓释、控释制剂指导原则 微囊、微球与脂质体制剂指导原则 细菌内毒素检查法应用指导原则 目的： 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求 效能指标： 评价分析方法的尺度 效能指标包括: 精密度, 准确度, 检测限,定量限,选择性, 线性与范围, 耐用性 第三节 药品分析方法的验证 一、准确度（accuracy） 系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。 (一)含量测定方法 回收率(Recovery) 回收试验 加样回收试验 3×3，至少9个测定结果 第三节 药品分析方法的验证 二、精密度(Precision) 系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之接近的程度。 表示：偏差(d)、标准偏差(s),、 相对标准偏差(RSD) 重复性: 同一实验室,同一人多次测定的精密度 中间精密度: 同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度 重现性: 不同实验室，不同人测定的精密度 第三节 药品分析方法的验证 三、专属性(Specificity) 指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性。 目视法 信噪比法 S/N=3 四、检测限(Limit of Detection, LOD) 药物能被检出的最低浓度(μg/ml) 五、定量限(Limit of Quantitation, LOQ) 药物能被定量测定的最低浓度(μg/ml) 信噪比法 S/N=10 第三节 药品分析方法的验证 影响因素：被测溶液的稳定性，流动相的组成和pH，商品柱的品牌，柱温等 六、线性与范围(Linearity And Range) 待测结果(响应值)与试样中被测物的浓度或量直接成正比关系的程度。 Y=a+bx （r=0.9999) 七、耐用性(Robustness) 测定条件稍有变动时，对测定结果的影响程度 第三节 药品分析方法的验证 ① ①已有重现性验证，不需验证中间精密度 ②如一种方法不够专属，可用其他分析方法予以补充 ② ③视具体情况予以验证 ③ 第五章药物定量分析与分析方法验证 定量分析样品的前处理方法 1 定量分析方法的特点 2 药物分析方法的验证 3 生物样品分析方法的基本要求 4 第一节 定量分析样品的前处理方法 Pretreatment of sample used in quantitative analysis 一、概述 含卤素药物 C—X 乙烯型卤和芳卤 烯丙型卤和苄卤 卤代烷型 卤素活泼性 I＞Br＞Cl＞F 分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越强；同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性增强更加明显 三氯叔丁醇 六氯对二甲苯 泛影酸 碘他拉酸 第一节 定量分析样品的前处理方法 第一节 定量分析样品的前处理方法 不经有机破坏 经有机破坏 直接测定 配位滴定法 氧化还原滴定法 水解后测定 碱水解 酸水解 经还原分解后测定 湿法破坏——凯氏定氮法 干法破坏 高温灼烧法 氧瓶燃烧法 第一节 定量分析样品的前处理方法 (一)、直接测定法 葡萄糖酸钙 EDTA配位滴定 富马酸亚铁 邻二氮菲-硫酸铈滴定 葡萄酸锑钠 间接碘量法 (二)、经水解后测定法 适用范围：金属原子不直接于碳原子相连或某些C-M键结合不牢固的有机金属药物。 第一节 定量分析样品的前处理方法 1、碱水解法 三氯叔丁醇 银量法 返滴定 2、酸水解法 适用范围：含卤素