松花粉总皂苷的提取及抗氧化活性分析.pdfVIP

摘 要 松花粉营养物质丰富，并且含有多种功能性物质，现代的一些药理试验已经证 明松花粉具有抗疲劳、提高免疫力、抗衰老、抗肿瘤、抗氧化等活性，具有很高的 保健价值。本论文主要是对松花粉总皂苷的测定方法、提取工艺、纯化方法和抗氧 化活性做了研究，为松花粉保健产品的进一步研发生产提供一定的实验依据。 1、松花粉总皂苷含量测定。以人参皂苷Re 为标准品，借鉴人参皂苷的检测方 法，用紫外分光光度法检测松花粉总皂苷含量。以 5%冰醋酸-香草醛溶液和高氯酸 为显色剂，在波长 560 nm 处测量吸光度，制作标准曲线，并得到回归方程 y = 0.8878x-0.0102 (R2 = 0.9998) ，以此为公式计算松花粉总皂苷的含量。经方法学测定， 该试验1 h 内稳定性良好，RSD(相对标准偏差)=0.73%，重复性和稳定性良好，RSD 分别为0.82%和0.58%，平均回收率和平均RSD 分别为95%和1.6%。以上结果表明 该实验方法简单可靠、重复性好，因此可以作为测定松花粉总皂苷含量的方法。 2 、松花粉总皂苷提取条件的优化。分别采用水和不同浓度的乙醇对松花粉总皂 苷进行提取，研究不同提取方法对提取率的影响情况。分别以单因素试验为基础， 再以正交试验确定最佳工艺条件。最终结果表明，当用水提取时，时间80 min、温 度70 ℃、料液比为1:25 时提取率最高；当用不同浓度的乙醇提取时，温度为70 ℃、 乙醇浓度60%、料液比1:25、时间150 min 时提取率最高。 3、松花粉总皂苷的纯化。采用AB-8 型大孔树脂对松花粉总皂苷进行纯化，结 果表明，上样液pH= 11、液体流速1 mL/min 为最优上样条件。70%乙醇洗脱后，经 过起泡性和薄层色谱法验证，得到粗品松花粉总皂苷，总皂苷含量为74% 。 4 、松花粉总皂苷的抗氧化活性研究。根据松花粉总皂苷对自由基消除率的测定， 以评价其抗氧化活性。用DPPH （1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl ）方法，以Vc 对自由 基消除率为对照，作对照曲线。结果表明，松花粉总皂苷有一定的抗氧化活性。 关键字：松花粉总皂苷；含量测定；提取工艺；纯化；抗氧化 I 万方数据 Abstract Pine pollen is rich in nutrition, and contains a variety of functional material. Previous pharmacological study has demonstrated that pine pollen has anti-fatigue, enhance immunity, anti-aging, antitumor, and antioxidant activities. This paper focused on the method of determination of total saponins in pine pollen, the optimization of the extraction process, purification and antioxidant activity, which may provide a certain experimental basis for further research and development production of pine pollen health care pro