2-2-1动物细胞培养和核移植技术(第1课时).ppt

 从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 一、动物细胞培养的过程: 1.选材时一般选择动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，为什么？ 2.为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 3.由组织块获得单个细胞一般用什么方法？ 4.用胰蛋白酶来分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 5.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？要注意些什么？ 6.为什么要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒？ 7.什么叫原代培养？ 8.什么叫传代培养？为什么需要传代培养？ 9.传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ 10.动物细胞培养能否象植物组织培养那样获得克隆个体？ 二、动物细胞培养的条件: 三、动物细胞培养的应用: §2.2.1动物细胞培养和核移植技术 高二生物选修3专题2第2节第1小节 细胞工程 应用的原理和方法 研究的水平 研究的目的 细胞生物学和分子生物学 细胞整体水平或细胞器水平 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念 分类 植物细胞工程 动物细胞工程 复习回顾：植物细胞工程采用的技术手段有哪些？其理论基础是什么？ 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞全能性 动物细胞工程 通常采用的技术手段 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 动物细胞核移植 是其他动物细胞工程技术的基础。 原理：细胞增殖 要求：画出流程图。 动物组织块 细胞悬浮液 原代培养 传代培养 单个细胞 加培养液 剪碎、胰蛋白酶 分装 1.选材时一般选择动物胚胎或幼龄动物的器官或组织，为什么？ 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺盛，容易培养。 2.为什么要对取出的动物组织进行处理，使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的营养供应和代谢废物的排出都较困难。 3.由组织块获得单个细胞一般用什么方法？ 4.用胰蛋白酶来分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？ 细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤维）。 胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。 先用剪刀剪碎,后用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 5.胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？要注意些什么？ 胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。 6.为什么要求培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒？ 悬液中分散的细胞置于适宜环境中培养，很快就巾附在瓶壁上，称为细胞贴壁。培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。 7.什么叫原代培养？ 取材（动物组织） →细胞分散→初次培养 8.什么叫传代培养？为什么需要传代培养？ 培养的细胞→细胞分散→继续培养 接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 9.传代培养的细胞都能一直传代下去吗？ 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 增殖缓慢，以至于完全停止。 少部分细胞核型可能发生变化。 少部分细胞获得不死性，遗传物质发生改变。 10.动物细胞培养能否象植物组织培养那样获得克隆个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 1、无菌、无毒 2、营养（培养基成分） 3、适宜的温度和PH值 4、必要的气体条件 （糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、 血清、血浆等。） O2和CO2 添加一定量的抗生素 定期更换培养液 培养液和培养器具无菌处理 培养基的不同是动物细胞培养和植物组织培养最重要的区别 36.5 +0.5度 PH为7.2-7.4 CO2的主要作用是维持培养液的PH 人们对细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚。血清可以提供有利于细胞生长增殖所需的激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏的营养物质等。 为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？ 保证细胞顺利的生长增殖 （1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。 （2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。 （3）用于检测有毒物质 （4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据 培养结果 培养目的 培养基特有成分 培养基性质 原理 动物细胞培养 植物组织培养 比较项目 细