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第9章 常见植物的脱毒与快速繁殖技术 本章主要内容(4学时) 蔬菜的脱毒与快繁 果树的脱毒与快繁 花卉植物的脱毒与快繁 农作物的脱毒与快繁 药用植物的试管快繁 树木的脱毒与快繁 本章教学目的与要求 (1)掌握马铃薯的生物学习性,掌握马铃薯脱毒培养的过程以及马铃薯脱毒苗的鉴定方法;掌握番茄的生物学特性及快速繁殖方法; (2)掌握苹果的脱 毒方法与快繁技术;掌握葡萄的脱毒与快技术;掌握草莓的脱 毒与快繁技术; (3)掌握兰花、香石竹、菊花、非洲菊、矮牵牛、百合等花卉的生物学特性,组培快速繁殖方法及自然繁殖法; (4)掌握甘薯的生物学特性,脱毒与快繁的方法及技术; (5)掌握芦荟、桔梗等药用植物的快繁技术; (6)掌握毛白杨、河北杨等绿化苗木的快繁技术。 第一节 蔬菜的脱毒与快繁 一、马铃薯的组织培养 马铃薯病毒的种类 (一)、马铃薯特性和生物学习性 (二)、马铃薯脱毒技术 1.脱毒种薯生产程序 2.茎尖培养脱毒 (2) 继代和生根 (3) 驯化 (三)、马铃薯无病毒苗的鉴定材料 (四)、马铃薯无病毒株的繁殖 二、番茄的组织培养 (二)、番茄的组织培养 (三)、番茄的胚培养 第二节 果树的脱毒与快繁 一、苹果的脱毒与快繁 (二)、脱毒技术 1、病毒种类:苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒等 。 2、微尖嫁接脱毒:砧木:去顶的离体培养幼苗,接穗:试管培养的无毒新稍;嫁接后培养生叶,移栽即可。 3、热处理脱毒:把植株置于38 ℃下25-50天。 4、茎尖培养脱毒:把0.1-0.3mm的茎尖离体培养。 5、脱毒苗的鉴定:抗血清法,电子 显微镜法,ELISA法、指示植物法。 (三)、苹果茎尖脱毒快繁技术 1、材料与消毒:带芽或茎尖的茎段;常规消毒,用无菌水洗3~5次 ;切茎尖约0.1~0.5mm。 2、芽的诱导:MS或LS+BA2+300~500CH或LH+3%蔗糖的培养基上,诱导芽的分化。 3、继代增殖培养:MS+BA0.5~1+CH300 培养基上增殖。 4、生根培养:1/2MS或 White,Nitsh附加IAA1、IBA0.2和GA33 等。 (四)苹果花粉培养 1、选材与预处理:选取中心花蕾吐红,周围花蕾明显增大,但花序尚未分离的花蕾,置于冰箱中1-3℃预处理。 2、消毒:70%的酒精浸约0.5min,再在10%漂白粉上清夜中浸15~20min。 3、胚状体诱导:接种到MS+2,4-D0.4 + KT0.2 + IAA4 + 3~8%蔗糖培养基上,25~30℃下培养。 4、生根:同茎尖脱毒中所用方法。 (五)胚培养 1、取材消毒:取授粉30~50d内的幼果,用70%酒精擦拭。取出种子,剥出幼胚或成熟胚。 2、启动培养:接种在BA0.25+IAA0.5的1/2MS培养基上。培养条件为25~30℃和1500~2000lx光照14h。 3、分化增殖:移植到加有BA0.5~1.0和CH300的1/2MS培养基上 ,在光下培养条件同上。 4、生根培养:同茎尖培养。 二、葡萄的脱毒与快繁 (一)、形态特征和生物学习性 葡萄属落叶木质藤本植物,葡萄地上部分的茎细。节上具有卷须,可向上攀援。叶近圆型或卵型,3~5裂。 葡萄原产于温带地区,不太抗寒。葡萄的根系抗寒力很弱,在-5~-7℃时即受冻。 (二)、葡萄的组织培养 1、选材接种:从生长旺盛的葡萄新梢顶端取1~2㎝的茎尖。消毒。分离出约2㎜长的茎尖,接种到培养基上。 2、培养基:MS培养基(无机盐减半为好),再添加BA1~2,NAA0.01,LH100,蔗糖2%,琼脂0.6%,而B5培养基愈伤组织化严重,茎尖生长不好。 3、苗分化:BA0.5,同时添加GA30.2,黑暗处理可促进幼茎的伸成,提高成苗率。 4、根分化:将苗转入MS+IAA0.4+NAA0.05培养基中进行生根。 (三)、葡萄无病毒苗的培养? 三、草莓的脱毒与快繁 (一)、形态特征和生物习性 草莓(Fragaria)属多年生草本植物,植株矮小,呈半平卧丛状生长,基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又较耐阴,要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。 (二)、草莓脱毒苗的培养 1、热处理脱毒 将草莓植株在40~41℃温度下处理4~6周。 2、微茎尖脱毒 (1)、初代培养 :取草莓顶芽,用自来水流水冲洗2~4h,然后剥去外层叶片,消毒, 切取0.2mm的茎尖。接入MS + BA0.25 + NAA0.25培养基中。培养条件为22~25℃,日照16~18h光强3000lx。 (二)、草莓脱毒苗的培养 第三节 花卉植物的脱毒与快繁 一、兰花的脱毒与快繁 兰花系兰科(Orchidaceae
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