AlltechELSD蒸发光散射使用及维护.ppt

Alltech 2000 ELSD使用及维护 美国奥泰科技(中国)有限公司 胡 彬 ELSD的原理: 检测三部曲 ： 雾化 溶剂的蒸发 检测 第一部：雾化 流动相及经色谱柱分离后的样品首先进入雾化器中, 通过喷雾器针孔与雾化气体混合,形成均匀的雾状液滴 第二部：溶剂的蒸发 液滴通过加热的漂移管后溶剂蒸发,保留下薄雾状的样品颗粒。 第三部：检测 样品颗粒通过流动池，激光“撞击”颗粒被散射，形成散射光。光电二极管接收散射光形成信号。 ELSD的主要结构： 按流路顺序由四部分组成： 雾化器(Nebulizer) 漂移管(Drift Tube) 光路部分(Optics) 出口(Exhaust) 两种操作模式：Impactor onoff 撞击器开(Impactor on):部分流动相及样品通过光路出口部分，剩余的雾化后形成的大液滴由右侧面的分流口排出；操作时需要较小的气流和温度； 撞击器关(Impactor off)：100％的流动相及样品通过光路出口部分，需要较高的气流和温度； ELSD加热的控制： 加热温度范围：室温－120℃(精度±1℃)； Impactor Off 模式下： 漂移管和雾化器加热到设 定温度，光池和出口 加热到90%的设定温度值； Impactor On模式下： 除雾化器不加热外，其余部分加热到设定温度； 加热部分的组成： 加热模块由三部分组成： 温度过热保险丝/ 加热器电热丝/温度热敏传感器 电源板上有四个指示灯： 由左至右依次为：光池－出口－漂移管－雾化器 颜色分别为：黄灯－红灯－绿灯－－桔黄灯 加热部分的组成： 温度过热保险丝由两根桔黄色的线组成，从电源板插入加热部分内部； 正常的情况下是通路的，烧断的时候是开路的； 加热器电热丝电阻： 出口 500?X2, 光池 380 ? X2, 漂移管 243 ? X2， 雾化器 270 ? X2 手动控制加热开关： 可以通过Manual Control菜单来手动控制雾化器和漂移管的加热的开关；（Menu)--(3.Diagnostics)-- (2.Manual Control) 通入流动相后雾化器温度有一个下降的过程是正常的，在高温时会更明显； 600-020XXXX系列有两个温度显示；600-030XXXX系列有四个温度显示 主板和输入输出板： 对雾化气体的要求： ELSD要求的入口压力范围：0.45-0.56MPa(65-80PSI),不要超过规定的压力，气压过大容易损坏ELSD内部的气体入口过滤器（货号50135） 使用空气压缩机作为气源时要定期更换变色硅胶和放水，分子筛和活性炭等应每年更换一次； 常规使用的气流量在1.5-3.2升/分钟之间，气体分为两路：一路进入漂移管，另一路进入尾吹部分； ELSD对流动相的要求： ELSD检测的是没有挥发的样品颗粒的散射光，所以要求使用高纯的无颗粒的试剂，溶剂的蒸发残渣值应小于1ppm; 流动相应经过0.45um的滤膜过滤后使用，注意选择好滤膜的种类，以免带入更多的颗粒； 必要时需要对溶剂进行重新蒸馏的处理； 非挥发性缓冲液及离子对试剂必须用挥发性的试剂取代，不能使用H3PO4,KH2PO4等； ELSD检测跟溶剂的UV吸收没有关系，可以使用一些在紫外上不能用的试剂，如丙酮等； 挥发性缓冲液和挥发性流动相改型剂 ELSD参数的设定： ELSD参数的设定： 选择正确的操作条件-Impactor开关(根据含水或有机溶剂，样品的挥发性等)； Impactor关(优化温度及气流-参考操作手册内的部分，注意流速若超过1ml/min.需要按比例提高建议值，小于1ml/min可以适当减少温度和气流)；使用梯度洗脱时应参考水相最多的条件设定参数； Impactor开(按样品及溶剂分两种初始条件)，上限流速5ml/min； 使用制备大流速超过5ml/min时，需要使用分流器(货号50194) ； ELSD开关机的顺序(Impactor Off 模式下)： 开机： 先用流动相平衡色谱柱约30分钟，注意不要通入ELSD中； 根据流动相的组成计算ELSD的温度和气流，将ELSD置于Run状态下通气升温； 达到条件后接入流动相，约15－20分钟后可以进样分析； 关机： 流动相中只含有有机相/水的情况： 1.切断流动相,保持ELSD的条件不变约15分钟; 2.将ELSD的温度降至70℃,气流量保持不变或适当降低,到达温度后停气关机; 流动相中含有缓冲液或改型剂的情况: 将色谱柱替换为两通, 直接用输液泵