黄芩素对人乳腺癌细胞株MCF7体外增殖和凋亡的影响.pdf

黄芩素对人乳腺癌细胞株MCF-7 体外增殖和凋亡的影响 摘 要 目的：通过体外培养人乳腺癌细胞株MCF-7 ，观察黄芩素对人乳腺癌 细胞株MCF-7 增殖和凋亡的影响及凋亡抑制蛋白Livin 和增殖核蛋白Ki67 的表达，探讨黄芩素对人乳腺癌细胞株MCF-7 抑制作用的机制及其临床意 义。方法：1.采用水溶性四氮唑-8 （Water Soluble Tetrazolium-8，WST-8 ） 比色法检测黄芩素在不同浓度(5.0μmol/L 、10.0μmol/L 、20.0μmol/L 、 40.0μmol/L、80.0μmol/L、160.0μmol/L)不同作用时间(24h 、48h 、72h)条 件下对人乳腺癌细胞株MCF-7 增殖活性的影响。2.通过流式细胞仪 （Flow Cytometry ，FCM ）采用Annexin V-FITC/PI 法检测经不同浓度(5.0μmol/L、 10.0μmol/L、20.0μmol/L、40.0μmol/L、80.0μmol/L、160.0μmol/L)处理的黄 芩素在不同时间(24h 、48h 、72h)条件下对人乳腺癌细胞株 MCF-7 凋亡 的影响。3.通过免疫细胞化学(Immunocytochemistry，ICC)技术检测经不同 浓度(5.0μmol/L 、10.0μmol/L 、20.0μmol/L 、40.0μmol/L 、80.0μmol/L 、 160.0μmol/L)处理的黄芩素在不同时间(24h 、48h 、72h)条件下作用于人 乳腺癌细胞株MCF-7，人乳腺癌细胞株MCF-7 中Livin 和Ki67 蛋白表达 情况。结果：1.相同黄芩素浓度，不同作用时间（24h 、48h 、72h ），各组 间比较 P0.05 ；相同时间，不同黄芩素浓度（5.0μmol/L 、10.0μmol/L 、 20.0μmol/L 、40.0μmol/L 、80.0μmol/L 、160.0μmol/L ），各组与对照组之间， 以及各浓度组间比较P0.05 ；并且黄芩素抑制细胞增殖作用呈时间-剂量依 赖性。2. 相同黄芩素浓度，不同作用时间 （24h 、48h 、72h ），各浓度组间 3 比较 P0.05 ；相同时间，不同黄芩素浓度（5.0μmol/L 、10.0μmol/L 、 20.0μmol/L 、40.0μmol/L 、80.0μmol/L 、160.0μmol/L ），各组与对照组之间， 以及各浓度组间比较P0.05 ，并且黄芩素对人乳腺癌细胞株 MCF-7 促凋 亡作用呈时间-剂量依赖性。3. 相同黄芩素浓度，不同作用时间（24h 、48h 、 72h ），Livin 蛋白的表达量，在各浓度组间比较 P 0.05 ；相同时间，不同 黄芩素浓度（5.0μmol/L 、10.0μmol/L 、20.0μmol/L 、40.0μmol/L 、80.0μmol/L 、 160.0μmol/L ），Livin 蛋白的表达量，在各组与对照组之间，以及各浓度组 间比较P0.05 。相同黄芩素浓度，不同作用时间（24h 、48h 、72h ），Ki67 蛋白的表达量，在各浓度组间比较，除了对照组在 24h 和 48h 间的比较 P0.05 ，其余各组间比较都是 P0.05 ；相同时间，不同黄芩素浓度 （5.0μmol/L 、10.0μmol/L 、20.0μmol/L 、40.0μmol/L 、80.0μmol/L 、 160.0μmol/L ），Ki67 蛋白的表达量，除了 24h 中对照组与黄芩素浓度为 5.0μmol/L 组比较 P0.05 ，其余各组与对照组之间，以及各浓度组间比较 P0.05 。4. Livin 与 Ki67 蛋白表达呈正相关，r24h=0.604 ，r48h=0.731 ， r72h=0.983 ，P0.05 。结论：1. 黄芩素可能对人乳腺癌细胞株 MCF-7 的增 殖活性具有抑制作用，并且抑制作用呈时间-剂量依赖性；2. 黄芩素可能 对人乳腺癌细胞株 MCF-7