黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究.pdf

摘 要 缺血性脑血管疾病因其在临床上发病率、死亡率和致残率高而严重威胁着 人类的健康。局部脑缺血使部分组织血流下降，导致细胞功能及形态的破坏。目 前治疗方法主要是以溶解血栓，恢复缺血脑组织的血液灌流为主。虽然再灌注可 以使被阻塞的血管再通，恢复缺血脑组织的血流供应，但客观上又加重了脑组织 的功能障碍和结构损伤产生继发性损伤，形成脑缺血再灌注损伤。临床上利用溶 栓剂实现血管再通以及患者的自然再灌均可引起脑缺血再灌注损伤，因此研究和 探讨缺血再灌注损伤的机制，开发新的脑缺血疾病的预防和治疗药物，能够很好 地为人类健康事业做出贡献，也具有广阔的市场前景。 研究目的：通过建立局灶性脑缺血再灌注损伤模型，研究黄芪多糖对大鼠局 灶性脑缺血再灌注脑组织的保护作用，并对其机制进行探讨。 研究方法：1．确立局灶性脑缺血再灌注损伤模型的具体制作方法。选用体 重250-300g SD 大鼠40 只，随机分为假手术组10 只、模型组30 只，对模型组 大鼠进行神经行为学评分，计算手术死亡率和成功率。制作石蜡切片，进行HE 染色，用于组织学观察，并从模型组中随机抽取10 只大鼠与假手术组脑含水量 测定比较。 2 ．研究黄芪多糖对局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量、SOD、MDA 、 梗死体积的影响。SD 大鼠随机分A 、B 两大组，A 组用于测定脑组织含水量、 SOD、MDA ，分假手术Ⅰ组，模型组，黄芪多糖低、中、高剂量组、黄芪注射 液对照组，每组18 只；B 组用于测定梗死体积，分假手术Ⅱ组，模型组，黄芪 多糖低、中、高剂量组，每组6 只。 3 ．利用免疫组化方法研究黄芪多糖对局灶性脑缺血再灌注损伤脑组织 TNF-α 和IL-1β 表达的影响。SD 大鼠随机分5 组，假手术Ⅱ组、模型组、黄芪 低、中、高剂量组，每组6 只。制作冰冻切片用于免疫组化实验和普通HE 染色， 观察组织形态并计算平均积分光密度。 研究结果：1. 利用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型手术的成功率 大概在80%，死亡率10%，模型组的脑含水量与假手术组明显升高。2. 与假手 I 黄芪多糖对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究 术Ⅰ组比较，模型组脑组织含水量及MDA 含量显著升高，梗死率显著增大，SOD 值明显降低；与模型组比较，黄芪多糖各剂量组的脑含水量，MDA 含量显著降 低，SOD 值显著增高，梗死率也显著减小。中、高剂量组的作用效果好于黄芪 注射液对照组。3. 与假手术Ⅱ组相比，模型组的TNF-α 和IL-1β 表达量（平均 积分光密度值）明显增高；与模型组相比，黄芪多糖中、高剂量组的TNF-α 和 IL-1β 表达量明显减少。从HE 染色的细胞形态观察，黄芪多糖治疗组较模型组 尤其中、高剂量组细胞形态较模型组有明显的改观，核区更加清晰，肿胀减少。 结论：1. 本实验室选用 SD 大鼠体重在 250-300g ，鱼线直径 0.26mm ， 360mg/kg 水合氯醛，颈总动脉进线并永久结扎颈总动脉和颈外动脉，可以获得 成功率较高，比较稳定的局灶性脑缺血再灌注损伤模型。2. 黄芪多糖可能通过 降低脑组织含水量、MDA 水平，升高 SOD 水平，减少梗死体积，对缺血再灌 注损伤的脑组织起一定的保护作用。3. 黄芪多糖对缺血再灌注脑损伤的保护作 用，可能与其减少脑缺血再灌注时期脑组织TNF-α 和IL-1β 的表达量有关。 关键词：黄芪多糖；脑缺血再灌注损伤；MDA ；SOD；TNF-α ；IL-1β II ABSTRACT Ischemic cerebrovascular disease threatens humans health as its high rate of mortality death and disability. Focal cerebral ischemia can reduc