生活饮用水微生物指标检验-培训课件.ppt

多管发酵法 定义： 总大肠菌群指一群在37℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 培养基： 乳糖蛋白胨培养液 二倍浓缩乳糖蛋白胨培养液 伊红美蓝培养基 设备： 显微镜 初发酵试验：采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h，观察产酸产气情况。 平板分离：对阳性管培养物，接种于伊红美蓝培养基，观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。 复发酵证实试验：对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验.， 结果报告（MPN）：根据标准所附检索表报告结果（MPN—”最可能数”）。 产气 初发酵、复发酵试验结果 多管发酵法结果 大肠菌群在伊红美蓝培养基上的典型菌落特征 大肠菌群革兰氏染色显微镜下的形态 耐热大肠菌群 多管发酵法 耐热大肠菌群（thermotoletant Coliform Organisms）：在44～44.5℃下具有与大肠菌群相同发酵及生物化学性能的菌群。 耐热大肠菌群的测定  1.1基本性质 培养温度提高到44～44.5℃，在此条件下仍能生长和发酵乳糖的菌群。 埃希氏菌属：粪源特异性 耐热大肠菌群 克雷伯菌属 肠杆菌属 总大肠菌群 柠檬酸菌属 其它(阴沟肠杆菌和弗氏柠檬酸杆菌) 注意：耐热大肠菌在配水系统中是不能繁殖的，除非管网中有充足的营养物质（升华需氧量超过10/mgL）,以及管网中没有余氯。 耐热大肠菌群的测定  1.2 主要用途 埃希氏大肠菌是最准确和专一的粪便污染指示 。 耐热大肠菌的检出，可认为近期水体直接或者间接地受到了粪便污染。 注意：GB/5749-2006规定，如果饮用水检出总大肠菌群，就必须检测耐热大肠菌或者埃希氏大肠菌。 多管发酵法 定义： 用提高培养温度的方法将自然环境中的大肠菌群与粪便中的大肠菌群区分开，在44.5℃仍能生长的大肠菌群，称为耐热大肠菌群。 培养基： EC培养基 伊红美蓝琼脂 设备： 无特殊设备 检测步骤 初发酵（同总大肠菌群），24h 耐热培养：阳性管接种（44.5度），24h 平板培养：阳性管接种EMB平板，24h 微生物指标检验方法的总结 检验日程安排 前一日：实验准备、采水瓶、培养基配制、灭菌 采水当日：水样采集、倾注培养、初发酵试验。 第二日：阳性管—EMB平板分离+EC肉汤。 第三日：涂片+革兰氏染色镜检、复发酵试验；EC阳性转EMB平板。菌落计数及结果报告。 第四日：报告总大肠菌群MPN和耐热大肠菌群MPN 。完成原始记录，并对所检测的水样进行综合分析，发检验报告。 生活饮用水微生物指标检验 检测依据：GB 5750-2006 《生活饮用水卫生检验规范》 实验目的与要求 掌握水样采集规则及注意事项。 熟悉常用水卫生细菌学指标。 熟悉菌落总数、大肠菌群、耐热大肠菌群的测定方法及检测意义。 学会对所检测的水样作综合分析。 生活饮用水中微生物指标 项目 单位 限值 说明 总大肠菌群 MPN/100mL或 CFU/100mL 不得检出 一般性污染 耐热大肠菌群 MPN/100mL或 CFU/100mL 不得检出 指示粪便污染 大肠埃希氏菌 MPN/100mL或 CFU/100mL 不得检出 指示粪便污染 菌落总数 CFU/mL 100 一般性污染 贾第鞭毛虫 个/10 L 1 肠道原虫 隐孢子虫 个/10 L 1 肠道原虫 水微生物检测的意义 水体的微生物污染问题日趋严重。 在各种水体，特别是污染水体中存在有大量的有机物质，适于各种微生物的生长。 水体中微生物污染的来源：土壤，以及人类、动物的排泄物污染。 水体中少数致病微生物（主要来自人或动物的粪便污染）可导致某些肠道传染病传播。 水微生物检测可用于评价水质情况，预报水质的污染趋势，以保证水质的卫生安全。 在实际工作中，对水质卫生质量的评价和控制，是无法对水体中各种可能存在的致病微生物一一进行检测。 一般选择有代表性的一种或一类微生物作为指示菌，通过对指示菌的检测，来了解水体是否受到过的微生物污染，是否有肠道病原微生物存在的可能。 水微生物的检测指标 菌落总数(aerobic bacterial count) 是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经48h培养后，所生长的细菌菌落的总数。 检测意义：作为一般性污染的指标，即评价被检样品的微生物污染程度和安全性。水样菌落总数越多，说明水被微生物污染程度越严重，病原微生物存在的可能性越大，但不