蓉生BCG-PPD培训资料_培训课件.ppt

五、我国PPD的研制现状 H-PPD始于1980年的中国药品生物制品检定所。 80年代中期中国药品生物制品检定所及成都生物制品研究所开始研制BCG-PPD。 90年代中后期中国药品生物制品检定所进行了非典型分支杆菌的PPD的研制。 六、选择BCG-PPD的原因 BCG接种需效果考核特异、敏感、效期适宜的配套皮肤反应试剂。 国际上现已淘汰OT，而PPDRT23及H-PPD（人型）的效果不够理想。 在1975、1983年国际生物标准协会就 PPD的菌型同源型的观点。 BCG是人们认识最清、最标化、应用最广泛的分支杆菌。 热休克蛋白HSP60或HSP70是PPD的主要抗原成分，具有较好的交叉反应效果，可作为T B流调及TB患者的临床辅助诊断。 BCG-PPD的提取对于制造者是比较安全的。 七、BCG-PPD和TB-PPD的效价研究 对象与方法 实验的对象：对BCG--PPD敏感人群。实验选定为临床确诊的结核病患者。根据中国生物制品规程要求，BCG--PPD与标准品TB--PPD设对照比较，要连续抽取 3 批产品分组实验，每组不少于15例。本次抽取4 批产品做样品，试验总人数为68人，试验分4组，每组人数15~20人。 试剂选用 BCG-PPD试验品：由成都生物制品研究所提供的检定合格的样品，批号分别为97-4，97-5，98-1，98--2，规格均为原液（浓缩品），其中蛋白浓度分别为94.18%（1.469mg/ml）、97.47%（2.535mg/ml）、95.40%（1.556mg/ml）、96.14%（2.150mg/ml）。试验时各批浓缩品均用合格的灭菌PBS稀释至50IU/ml，30min内用于人体。 TB-PPD标准品：由中国药品生物制品检定所提供，批号为0010071，规格为50 IU/ml，效期内使用。 编码：TB--PPD，批A；BCG-PPD试验品，批号97-4—B，批号97-5—C，批号98-1—D，批号98-2—E。 实施方法：采用同体双臂皮试观察法，用一次性注射器于观察者左右前臂掌测中央处分别作皮内注射0.1 ml（含5IU）的BCG-PPD实验样品及TB-PPD标准品，72h后测量反应结果。 测量标准：以毫米为单位（mm），（测量硬结反应和红晕反应的最大横径＋最大纵径）÷2＝平均直径。 实验记录：①局部反应硬结的纵横直径。②红晕反应的纵横直径。③有无异常反应。 结 果 通过4组的测量，包括硬结及红晕反应的平均直径、阳性率（硬结反应和红晕反应直径≥5 mm为阳性）、两臂反应的直径对比、反应一致性统计。四批BCG--PPD与TB-PPD实验结果以硬结为准，经统计学处理无显著性差异（P0.05）。 表1 四批BCG-PPD与TB-PPD的对照试验结果 编 码 观 察 人 数 硬结反应 红晕反应 平均直径 阳性均径 局部强阳性反应 阳性人数 (%) 阳性人数 （%) 硬 结 （mm） 红 晕 （mm） 硬 结 （mm） 红 晕 （mm） A 17 16 (94.12) 13 (76.47) 14.65 17.12 15.56 18.19 1例 双臂(水泡) B 17 16 (94.12) 13 (76.47) 13.94 16.88 14.81 17.94 A 15 14 (93.33) 9(60.0) 12.80 11.13 13.71 11.93 C 15 14 (93.33) 9(60.0) 12.60 10.63 13.50 11.39 A 16 15 (93.75) 9(56.25) 15.69 10.59 16.73 11.30 2例 双臂(水泡) D 16 15 (93.75) 9(56.25) 15.22 10.06 16.23 10.73 ? A 20 20(100.0) 8(40.0) 14.88 9.68 14.88 9.68 2例 双臂(水泡) E 20 20(100.0) 8(40.0) 14.90 9.80 14.90 9.80 表2 四批BCG-PPD与TB-PPD硬结反应符合率 编码 人数 阳性 人数 阴性 人数 符合率 （%） 编码 人数 阳性 人数 阴性 人数 符合率 （%） A 17 16 1 100 A 16 15 1 100 B 17 16 1 D 16 15 1 A 15 14 1 100 A 20 20 0 100 C 15 14 1 E 20 20 0 表3 BCG-PPD与TB-PPD在四组TB患者的效价比较 试验组号 1 2 3 4 样品名称 BCG-PPD TB-PPD BCG-PPD TB-PPD BCG-PPD TB-PPD BCG-PPD TB-PPD 样品编码 B A C A D A E A 平均反应