急性淋巴细胞白血病MICM分型分析.docVIP

急性淋巴细胞白血病MICM分型分析 杨涛 熊峰 （甘肃省兰州市第一人民医院血液科，兰州，730050） ［摘要］目的：探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）患者骨髓细胞形态学（M）、细胞免疫学（I）、细胞遗传学（C）和分子生物学（M）即MICM的关系及其临床意义。方法：采用细胞形态学检查、染色体R带核型分析、流式细胞仪细胞免疫表型检测和套式逆转录酶链反应（RT-PCR）检测bcr/abl融合基因。结果：以FAB分型为基础的形态学诊断L1型25.0%，L2型71.88%，L3型3.12%；免疫表型检测其中B-ALL25例（78.13%），T-ALL3例（9.38%），还有4例患者同时表达髓系和B系，为急生杂合性白血病（HAL），占12.49%；染色体异常患者中，以t (9；22)（q34；q11）(87.50%)频率最高。bcr/abl融合基因检测，有9例（28.13%）阳性。结论：在形态学基础上其于免疫表型，细胞遗传学特征及融合基因表达可以对ALL进行准确的分型，对患者的治疗方案选择及预后的判断均具有临床价值。 ［关键词］急性淋巴细胞白血病；MICM分型 ［中图分类号］R733.71 ［文献标识码］B 1976年法国（Franch）、美国（America）和英国(Britain)等三国细胞形态学专家讨论，制定了关于急性白血病的分型诊断标准（FAB分型），1985年后FAB协作组成员与免疫学家、细胞遗传学家在细胞形态学（Morphology，M）基础上，开展了细胞免疫学（immunology，I ）、细胞遗传学（cytogenetics，C）和分子生物学（molecular biology，M），即为白血病MICM分型。该分型在白血病的诊断、治疗和预后判断方面具有实用价值，已广泛应用于临床。急性淋巴细胞白血病（ALL）是由于原始及幼稚淋巴细胞在造血组织异常增殖并浸润全身各组织脏器的一种造血系统恶性克隆性疾病［1］现将我院收治入院的32例急性淋巴细胞性白血病（ALL）的MICM分型特点进行分析，报告如下。 1 对象与方法 1．1 对象 2005年1月------2010年10月兰州市第一人民医院收治的原发ALL患者32例，男18例，女14例，中位年龄10（2--25）岁，大部分患者伴有全身乏力症状、纳差伴皮肤出血点，贫血貌，肝脾肿大，少数出现胸骨压痛。患者治疗前经血常规、骨髓像、细胞化学染色、流式细胞术免疫分型、染色体核型和ALL特异相关融合基因联合检测。 1．2 方法 1．2．1常规抽取骨髓适量（约0.2ML），涂片后做瑞氏染色，同时进行相关组织化学染色，其中包括过氧化酶、非特异性酯酶G氟化钠抑制试验及糖原染色细胞检查，并按FAB分型标准进行形态学分型，将急性淋巴细胞白血病分为L1、L2、L3三型。 1．2．2免疫分型 取肝素抗凝骨髓2---3ML，常规分离单个核细胞，采用活细胞间接荧光标记，流式细胞仪（COULTERXL2型，BECKMAN公司产品）检测。所用单抗包括T系的CD3、CD5、CD7；B系的CD10、CD19、CD22；髓系的CD13、CD33以及干/祖系的CD34、CD38。阳性标准：淋系及髓系抗原阳性细胞＞20%，CD34阳性细胞＞10%。 1．2．3细胞遗传学分析 肝素抗凝采集骨髓标本2---3ML，分离单个核细胞。经短期24h培养后，按常规方法制备染色体标本，用R带方法进行显带。根据《国际人类细胞遗传学国际命名法（ISCN）》进行核型分析。 1．2．4 分子生物学检查 治疗前取肝素抗凝骨髓5ML，分离单个核细胞，提取细胞总RNA，采用套式逆转录酶链反应（RT-PCR）检测bcr/abl融合基因，根据断裂点不同，将bcr/abl融合基因分为ela2、b2a2、b3a2，分别表达P190、P210融合蛋白。 2 结果 2．1细胞形态学分型 32例初发的急性淋巴细胞白血病中，L1型8例（25.0%），L2型23例（71.88%），L3型1例（3.12%），这说明根据FAB标准诊断L2型比例最高。 2．2免疫表型分析 32例患者治疗前进行了免疫表型分析，其中B-ALL25例（78.13%），T-ALL3例（9.38%），还有4例患者同时表达髓系和B系，为急生杂合性白血病（HAL），占12.49%，B-ALL患者中HAL-DR（80.0%）和CD19（76.0%）表达最高，其次为CD34（72.0%）、CD22（68.0%）。因此，CD19是诊断B- ALL最有价值的抗原，髓系抗原表达中CD13（64.0%）表达最强，其次CD33（40.0%）。T-ALL患者中CD5表达最高，全部阳性（100%），其次为CD7（66.67%）和CD3（66.67%），这说明CD5、CD3和CD7可作为诊断T