体内彗星试验在药物遗传毒性评价中研究方法.PDF

- 272 - Drug Evaluation Research 第 37 卷 第 3 期 2014 年 6 月 • 综 述 • 体内彗星试验在药物遗传毒性评价中的研究方法 张建军，姜 凌，柴振海* 天津药物研究院 天津市新药安全评价研究中心，天津 300301 摘 要：体内彗星试验是采用单细胞凝胶电泳的方法检测体内 DNA 损伤的技术。具有灵敏度高、操作简便、经济快速等优 点。随着遗传毒性研究的发展，体内彗星试验已经成为重要的药物遗传毒性评价方法。对动物试验阶段和彗星试验阶段各操 作步骤进行了归纳总结，以期对相关方法学建立提供参考，并提出采用简化和标准化的研究方法将有利于体内彗星试验在药 物遗传毒性评价的应用。 关键词：体内彗星试验；单细胞凝胶电泳；药物评价；遗传毒性 中图分类号：R994.1 文献标志码：A 文章编号：1674 - 6376 (2014) 03 - 0272 - 04 DOI: 10.7501/j.issn.1674-6376.2014.03.020 Research methods of in vivo comet assay on drug genotoxicity evaluation ZHANG Jian-jun, JIANG Ling, CHAI Zhen-hai Tianjin Center for Drug Safety Assessment and Research, Tianjin Institute of Pharmaceutical Research, Tianjin 300301, China Abstract: The in vivo comet assay is a technology using single cell gel electrophoresis for the detection of DNA damage in vivo. The assay has the advantages of high sensitivity, ease of performance, low cost, and short time. With the development of the genotoxicity research, the in vivo comet assay has become an important method for genotoxicity assessment. This article reviewed some operating procedures in the animal test stage and the comet test stage, and suggested that using simplified and standardized research methods should be good for the application of in vivo comet assay on drug genotoxicity evaluation. Key words: in vivo comet assay; single cell gel electrophoresis; drug evaluation; genotoxicity 彗星试验（comet assay ）又称单细胞凝胶电泳 20 世纪 90 年代，人用药物注册技术要求国际 （single cell gel electrophoresis ）。1984 年，Ostling 和 协调会议（ICH ）和经济合作发展组织（OECD ）颁 Johanson 首次采用该技术在中性条件下检测单细胞 布了一系列遗传毒性相关指导原则，用于药物评价 [1] [2] 的DNA 双链断裂 。1988 年，Singh 等 建立了碱 的遗传毒性标准组合及试验技术方法均未出现大的 性（pH ＞13）单细胞凝胶电泳方法，该技术不仅可 变化。而 2011 年 11 月，ICH 正式颁布了新的遗传 检测 DNA 的单、双链断裂，还