苦精对哮喘小鼠气道中钙结合蛋白S100A9与气道黏液分泌的.PDF

医学研究生学报 ２０１７年２月 第３０卷 第２期　 Ｊ Ｍｅｄ Ｐｏｓｔｇｒａ，Ｖｏｌ．３０，Ｎｏ．２，Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２０１７ ·１５５ · 论　 　 著 （基础研究） 苦精对哮喘小鼠气道中钙结合蛋白Ｓ１００Ａ９ 及气道黏液分泌的影响 闫　 珊，程　 丽，赵晓宁，黄轶民，刘静静，高福生 　 　 ［摘要］　 目的　 研究发现在人体肺部存在苦味受体，目前关于苦味受体激动剂与气道黏液分泌的研究报道较少。 探讨 肺部苦味受体激动剂苯甲地钠铵（苦精）对哮喘小鼠气道中钙结合蛋白Ｓ１００Ａ９水平和气道中黏液分泌的影响。 　 方法　 将 健康清洁型雄性ＢＡＬＢ／ ｃ小鼠按随机数字表分成５组：正常对照组，慢性哮喘组，苦精干预 １、２、３周组，每组８只。 除正常对 照组外，其余组小鼠于第 １天和第 １５天分别腹腔注射０．２ｍＬ氢氧化铝混悬液［含 １００μｇＯＶＡ，１ｍｇＡｌ（ＯＨ） ）］致敏。 苦精干 ３ 预１、２、３周组小鼠分别从第 １０、９、８周起在激发的基础上吸入８００μｇ苦精 １、２、３周。 ＥＬＩＳＡ法及免疫组化法检测肺泡灌洗液 （ＢＡＬＦ）上清、肺组织中Ｓ１００Ａ９ 蛋白水平，糖原 ＰＡＳ染色及实时定量 ＰＣＲ显示气道杯状细胞数量、黏液性物质及黏蛋白 ＭＵＣ５ＡＣ的含量。 　 结果　 与正常对照组ＢＡＬＦ上清中Ｓ１００Ａ９水平［（６．１９±０．６１）ｎｇ／ ｍＬ］比较，慢性哮喘组以及苦精干预 １、 ２周组［（１１．８９±０．７７）、（１０．６９±０．７９）、（９．４９±０．９９）ｎｇ／ ｍＬ］明显升高（Ｐ＜０．０５）；苦精干预 １、２、３周组较慢性哮喘组降低（Ｐ＜ ０．０５）。 与正常对照组比较，免疫组化染色显示慢性哮喘组气道上皮细胞中Ｓ１００Ａ９高表达，苦精干预１、２、３周后，气道上皮细 胞中Ｓ１００Ａ９表达随苦精干预时间增加而减少。 糖原ＰＡＳ染色显示，与正常对照组比较，慢性哮喘组气道上皮杯状细胞增生， 黏液过度分泌（Ｐ＜０．０１）。 与慢性哮喘组比较，苦精干预 １、２、３周组杯状细胞数量、黏液分泌量随苦精干预时间的增加而减 少。 与正常对照组比较，慢性哮喘组以及苦精干预 １、２周组肺组织中黏蛋白ＭＵＣ５ＡＣ ｍＲＮＡ表达增高，差异有统计学意义 （Ｐ＜０．０５），与慢性哮喘组比较，苦精干预后，ＭＵＣ５ＡＣ的ｍＲＮＡ表达降低，并随苦精干预时间的增加而降低，差异有统计学意 义（Ｐ＜０．０５）。 　 结论　 苦精下调小鼠杯状细胞的黏液分泌可能与上皮细胞钙结合蛋白Ｓ１００Ａ９有关。 　 　 ［关键词］　 苯甲地钠铵（苦精）；哮喘；苦味受体；钙结合蛋白Ｓ１００Ａ９；气道黏液 　 　 ［中图分类号］　 Ｒ５６２．２５　 　 　 ［文献标志码］　 Ａ　 　 　 ［文章编号］　 １００８⁃８１９９（２０１７）０２⁃０１５５⁃０５ 　 　 ［ＤＯＩ］　 １０．１６５７１／ ｊ．ｃｎｋｉ．１００８⁃８１９９．２０１７．０２．００９ Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｅｎａｔｏｎｉｕｍ ｂｅｎｚｏａｔｅ ｏｎ ｃａｌｃｉｕｍ ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓ１００Ａ９ ａｎｄ ｍｕｃｕｓ ｉｎ ｔｈｅ ａｉｒｗａｙｓ ｏｆ ａｓｔｈｍａｔｉｃ ｍｉｃｅ １ １ １ １ ２ ２ ＹＡＮ Ｓｈａｎ ，ＣＨＥＮＧ Ｌｉ ，ＺＨＡＯ Ｘｉａｏ⁃ｎｉｎｇ ，ＨＵＡＮＧ Ｙｉ⁃ｍｉｎ ，ＬＩＵＪｉｎｇ⁃ｊｉｎｇ ，ＧＡＯ Ｆｕ⁃ｓｈｅｎｇ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ，ＷｅｉｆａｎｇＭｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｅｉｆａｎｇ ２６１０５３，Ｓｈａｎｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｗｅｉｆａｎｇ Ｍｅｄｉｃａ