人基因全长()+的克隆与定位!.PDF

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人基因全长()的克隆与定位!

第 卷 第 期 年 月 !A’ ! # #$$ # !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人!#$%#$ ’ 基因全长()*+ 的克隆与定位! ! ! ! ! ! 岳 文 孙丽亚 李春海 高艳红 秦立蓬 白慈贤 裴雪涛 !# 军事医学科学院输血研究所干细胞生物学研究室,北京 !$$%$ ; # 军事医学科学院附属医院,肿瘤分子生物学研究室,北京 !$$%$ 摘要 利用分子克隆技术和生物信息学手段,克隆并命名了人 基因 此基因 全长 =53:43: ! # ;?@/ ,含有 完整开放读框,预测编码 的膜内蛋白 新基因在核酸序列上与鼠 *’A 5 ’) B .*. 5 A CD # 基因有 同源,其编码氨基酸序列与鼠 蛋白 同源 生物信息学分析表明该基 =53:43: .) E =53:43: .%E # 因定位于 区域,基因组 全长为 ,由 个外显子和 个内含子组成,内含子 .F # !( # ’ ?@/ # ’ C * 和外显子之间的剪切完全符合 法则 利用绿色荧光蛋白与 基因的融合蛋白表达载 GH(/G # =53:43: ! 体转染,IJ(A 细胞表明=53:43: ! 表达的蛋白定位于胞核,且转染后的细胞中较多见胞核形态的改 变,例如出现双核或巨型核# 关键词 !#$%#$ ’ ()*+ 克隆 生物信息学 亚细胞定位 鼠=53:43: 基因是 !..A 年被发现和命名的一种 物信息学手段,获得该基因的;?@/ 全长,命名为 在鼠胚胎发育早期呈阶段特异性表达的基因,在卵 人=53:43: ! 基因,并对其进行初步的功能分析与研 母细胞和 细胞阶段的受精卵细胞的;?@/ 文库中, 究# 有$ # ’ E 的克隆可以检测到=53:43: 基因的表达(而 此时作为对照的 (2;83: 的表达率仅为$ #$%E ),到% ’ 材料与方法 ! 细胞阶段,=53:43: 基因的表达率下降 K !$ L ) # 因 ’ , ’ 卵巢癌细胞的培养 其所表达的部分蛋白和分裂期的纺锤体 ( )密 =53:46 卵巢癌细胞系IP,/Q’ 来源于军事医学科学院 切相关,由此而被命名为 =53:43:,简称 ! #$ 基 肿瘤分子生物学实验室 细胞接种于含有

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