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ICS 65.020.01
B 04
DB21
宁 省 地 方 标 准
DB21/T 2396 2015
水稻品种抗稻瘟病基因检测 PCR 法
2015 - 05 - 18 发布 2015 - 07 - 18 实施
辽宁省质量技术监督局 发 布
DB21/T 2396 2015
前 言
标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。
标准由辽宁省农业科学院提出。
标准由辽宁省农村经济委员会归口。
标准由辽宁省农业科学院创新中心负责起草。
标准主要起草人:陆晓春、郑文静、丛玲、赵家铭、王妍、张丽霞、白春明、王春语、朱振兴、马丽、
李丹、王平、李金红等。
标准由辽宁省农业科学院创新中心负责解释。
I
DB21/T 2396 2015
水稻品种抗稻瘟病基因检测 PCR 法
1 范围
本标准规定了检测水稻品种抗稻瘟病基因的PCR 检测法,包括原理、仪器设备、 剂和材料、防
污染措施、实验步骤及结果分析。
本标准适用于水稻品种中抗稻瘟病基因pita 、pid2、pid3、pik、pikp 、pikm 、piks 、pi21 、pi36、pi37
和pi5 的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版 适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版 (包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和 验方法
GB/T 19495.2 转基因产品检测 实验室技术要求
农业部1485 号公告--4—2010 转基因植物及其产品成分检测 DNA 提取和纯化
3 术语及缩略语
下列术语及缩略语适用于本标准
3.1 正向引物:处于DNA 双链上游的引物,简称F 引物。
3.2 反向引物:处于DNA 双链下游的引物,简称R 引物。
3.3 内参引物:在聚合作用起始时,可以刺激合成另一种大分子,并与反应物以共价键形式连接的序
列。
3.4 DNA: Deoxyribonucleic acid, 脱氧核糖核酸。
3.5 PrimeSTAR HS DNA Polymerase: 高保真DNA 聚合酶。
3.6 PrimeSTAR Buffer (5×): 5×PCR 反应液。
3.7 dNTP Mixture (10mM): 单核苷酸混合液 (10mM)。
3.8 PCR: Polymerase chain reaction。
3.9 TAE:Tris-Cl、冰醋酸、EDTA 缓冲液。
1
DB21/T 2396 2015
3.10 Goldenview:核酸染料,替代溴化乙锭。
3.11 DNA Marker :标准分子量的核酸标记。
3.12 bp: Base pair, 碱基对。
3.13 Tris:tris(hydroxymethyl)aminomethane,三羟甲基氨基甲烷。
4 原理
根据水稻抗病基因保守区序列设计特异性引物,提取不同水稻品种的DNA,对 样进行PCR 扩增,
依据是否扩增
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