一种从活性污泥中提取微生物总DNA的方法_郑维.pdf

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2017-06-01 发布于河南
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一种从活性污泥中提取微生物总DNA的方法_郑维

China B iotechnology, 2008, 28( 7): 97~ 99 * DNA ** 郑维权春善朴永哲王军华范圣第 ( - 116600) 对活性污泥的微生物群落进行研究的首要前提是获得大量的高纯度微生物基因组 DNA 建了一种高效简便的提取活性污泥总DNA 方法从提取的核酸总量纯度基因组完整性等多方面对所得到的 DNA质量进行了评价, 结果表明, 从单位活性污泥中提取的 DNA 得率为 105 ~ 82 Lg/g, 结构完整, 纯度很高, 无需进一步的纯化, 可直接进行微生物群落分析及构建文库等后续分子生物学操作现在实验室使用的提取活性污泥中DNA 的方法, 纯度普遍都无法达到 PCR反应和建文库的要求, 建的活性污泥 DNA 提取方法则可以克服这一难题活性污泥 DNA提取 PEG 16S rDNA Q52 DNA, DNA, , , , , , 蕰藏着大量尚未被 1 , 1. 1 , , , , DL8DL10DK 8DK10MK 8MK10CTAB , (Amresco)PEG8000( Amresco)(Am resco)Ex , , TM Taq E coR IH in d III () , , [ 1~ ] , 1. 2 [4, 5] DNA , (), 10 DNA m in ( 8 000 @ g, 4e ) , , 10 g , ( pH 8. 0) , DNA, , 10 m in ( 8 000 @ g, 4e ) , , - 70e DNA 1. 3 DNA 8m l I( 0. 15 m ol/L NaCl, 0. 1 m ol/L EDTA, 10 mg/m l, pH 8. 0), 7e : 2008-0 -02 : 2008-04-15 1~ 2 h, 8m l II(