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深 圳 大 学 实 验 报 告 课程名称： 生命科学基础实验 实验项目名称： 微生物的显微观察 专业： 指导教师： 报告人： 学号： 班级： 同组成员： 实验时间： 实验报告提交时间： 教务处制 一．实验目的与要求： 1.了解常见的微生物及其与人类生产生活的关系加深对微生物分布广泛性的认识； 2.学习细菌、酵母、霉菌等临时制片和染色方法，观察了解其形态结构特征。 二．实验原理： 微生物形态观察主要包括群体形态和个体形态的观察。 群体形态包括：1、培养特征：是,染色等,制作临时或永久性标本,观察单个微生物细胞结构指微生物在培养基上所表现的群体形态和生长情况,包括菌落特征和液体培养时的生长特征,是认识微生物和微生物分类的重要依据。2、菌落：是指个体微生物在固体培养基上繁殖成的肉眼可见的群体。 个体形态：主要通过固定、染色，油镜观察结构特征,并了解生活史等. 三．实验过程及内容： 1、学习细菌的染色制片并观察具体形态； 2、观察霉菌菌落特征，学习霉菌的制片方法，观察霉菌个体形态及各种孢子的形态，了解生活史； 3、酵母菌的培养特征及形态观察； 4. 各种微生物装片的显微观察。 四．方法、步骤： (一) 细菌的观察 1、涂片：取洁净玻片一张，在中部用吸管取极少量菌液涂布，制成直径lcm左右的菌膜。 2、干燥: 涂片在室温中自然干燥。3、烤片: 干燥后的涂片，让无菌膜的面向酒精灯火焰约5cm高处通过三次，使细菌蛋白变性，菌体牢固黏附于载玻片上。（肉眼可见菌膜发白） 4、染色: 平放载玻片，在菌膜上滴加结晶紫染液2滴，覆盖全部菌膜。染色1分钟，细流水冲冼剩留染液，滤纸吸干其它部位水份 5、先用低倍镜寻找染色区域,换高倍镜,再换用油镜观察. 6、在体视显微镜下，观察大肠杆菌菌落形态，记录。 本次实验观察大肠杆菌和枯草芽孢杆菌 (二) 霉菌的形态观察 1、取洁净的载玻片，于中央滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染液。 2、用镊子从培养皿中轻轻取出小块带菌培养基，放在载玻片上，加滴乳酸石炭酸棉蓝染液覆盖之，从液滴侧盖上盖玻片，注意尽量避免产生气泡。 3、吸水纸吸去多余染液，擦干载玻片其它部分液体，将制好的载片标本置于低倍镜下观察，必要时换用高倍镜。 4、重点观察观察霉菌的菌丝与孢子形态，拍照记录。 5、肉眼观察霉菌菌落形态。 (三) 酵母菌的观察 1. 观察液体培养基中生长的酵母菌和轻嗅气味。 2、取洁净的载玻片，于中央滴一滴酵母溶液； 3、把盖玻片从一侧盖在载玻片上，注意不要产生气泡；吸水纸吸去多余液体 4、将制好的载片标本置于低倍镜下观察，必要时换用高倍镜； 4、观察酵母装片,并记录 （四）微生物永久制片标本观察 1.青霉菌：注意孢子梗与分生孢子 2.曲霉菌：注意菌丝体、孢子和假根 3.根霉菌：孢子囊、孢子、孢子梗等 4.其它：本周末时, 收集生活中的食物残渣等, 置可封闭的容器中, 敞开在环境中暴露1-数小时, 盖盖封闭, 必要时加入一团吸水滤纸（不滴水为度）以保持湿度，室温静置数日，每天观察残渣表面微生物生长状况 (一般会有黑根霉，绿霉，白霉，曲霉等菌斑在2-3天内出现） 四、 形态观察结果： 1.细菌观察 大肠杆菌菌落：圆润光滑，色白；杆菌外形特征：长轴远比横轴大，呈杆状。孢子呈圆形，直径较杆菌的大。 附：大肠杆菌染色观察照片 2.酵母观察 细胞培养液呈乳白色浑浊，瓶口有发酵香味；细胞外形呈椭圆，内部有折光不同的小亮点为细胞核，常见两个细胞相连 附：活细胞观察图片 3、霉菌观察 本次实验观察了成片生长的黑根霉、米根霉和毛霉，菌苔呈绒毛状或蛛网状，无光泽。体视显微镜下看到黑根霉具有直立的菌丝（孢子梗）和顶上黑色圆形孢子囊；米根霉菌丝及孢子囊为白色，菌丝上的孢子囊又可以发出3-4条菌丝再分别与孢子囊连接。孢子囊见到两种，一种是圆形，另一种是圆形多泡状；白毛霉仅见细长菌丝，无孢子 黑根霉经棉蓝染色后，显微镜观察，可见染成褐色的中空菌丝，孢子囊和颗粒状孢子。 毛霉观察装片 黑根霉 4.永