荷斯坦阉牛瘤胃液中阿魏酸酯酶与乙酰酯酶的酶学特性研究.pdf

中国农业大学学报 gO11，16(1)：73—78 JournalofChinaAgriculturalUniversity 荷斯坦阉牛瘤 胃液中阿魏酸酯酶和 乙酰酯酶的酶学特性研究 杨红建 岳 群。 曹 阳春 (1．中国农业大学 动物科学技术学 院，北京 100193 2．中国农业大学 生物学 院，北京 100193) 摘 要 为研究瘤 胃液 中阿魏酸酯酶和 乙酰酯酶的酶学特性，自安装永久瘤 胃瘘管的成年荷斯坦 阉牛瘤 胃中采集 瘤 胃食糜液 ，4℃ 1000g离,·1210rain制备成粗酶液 ，测定 了粗酶液中阿魏酸酯酶和 乙酰酯酶活性及其酶促反应动 力学参数。结果表 明，瘤 胃液 中阿魏酸酯酶酶促反应最适 pH 为 9．0，最适温度为 4O～50℃；用阿魏酸 甲酯作为为 酶促反应标准底物 ，测得米氏常数 (K )为 0．76mmol／L，最大反应速度 ( )为 5．43mU；乙酰酯酶酶促反应最 适 pH 为 8．0，最适反应 温度 为 5O℃ 。用对一硝基 苯 乙酰酯作 为标 准底物 ，测得 K 为 0．64mmol／L， 为 9l|OO mU。研究发现 Fe。可 以促进阿魏酸酯酶酶促反应 ，而 Cu。等金属 离子可以抑制阿魏酸酯酶酶活性 ；Mg 、K 、 Co 、Caz和 Mn 则可促进 乙酰酯酶酶促反应 。尽管瘤 胃内环境并不能为 2种酯酶发挥最大酶效提供最适温度 和 pH条件 ，相比较而言 ，阿魏酸酯酶在瘤 胃液 中稳定性更优于乙酰酯酶 。 关键词 牛；瘤 胃液；阿魏酸酯酶；乙酰酯酶 ；酶学特性 中图分类号 S852 文章编号 1007—4333(2011)O1—0073—06 文献标志码 A Enzymologicalcharacterizationofferuloylandacetylesterases intherUmenfluidsofHolsteinsteers YANGHong—jian ，YUEQun ，OAOYang—chun (1 CollegeofAnimalScienceandTechnology，ChinaAgriculturalUniversity，BeiJlng100193，China 2 CollegeofBiologicalSciences，ChinaAgriculturalUniveristy，Belling 100193，China) Abstract To determineenzymologicalcharacteristicsofferuloylesterase (FAE) and acetylesterase (AE)，rumen fluidscollectedfrom Holsteinsteersintalledflexibleruminalcannulawerecentrifugedat1000g at4 ℃ for10 minto preparecrudeenzymesolutions．TheoptimalpH is9 0andoptimaltemperatureforFAE is40—50 ℃ ：andtheMichaelis constants(K )is0．76mmol／Landmaximumvelocities(V )againstmethylferulateis5．43mUatpH6．0and39 ℃ ．TheoptimalpHfOrAEis8．0andoptimaltemperatureforAEis50℃ ，andthe K and V againstp-nitrophenyl acetateatpH7．0and39℃ were0．64mmol／Land91．00mU CationssuchasMg” ，Zn” ，K ，Cu” ，Co” ，Ca and Mn2 inthisstudyinhibitedtheactivitiesofesterasesforFAEwhileFe” hasopsiteeffects．ThecationsofMg” ．K ． Co” ，Ca andMn” hadas