色谱法分离卵磷脂.pdf

( ) 　　第 22 卷 　第 4 期 　 吉首大学学报 自然科学版 Vol . 22 　No . 4 　　 　　2001 年 9 月 Journal of Jishou University (Natural Science Edition) Dec . 2001 　　 ( ) 文章编号 :1007 - 2985 2001 04 - 0069 - 03 色谱法分离卵磷脂 李 　卫 ,邵友元 ,黄光斗 (湖北工学院化工系 ,湖北 武汉 　430068) 摘 　要 :对以硅胶为吸附剂的 1. 5 cm ×40 cm 色谱柱分离卵磷脂的操作条件进行了研究. 利用薄层层 ( ) 析法确定了洗脱剂的组成为甲醇/ 氯仿混合液 p H 值 3～4 . 通过洗脱方式及梯度差实验 ,得出梯度差为 V ( ) ( ) ( ) ( ) CH OH ∶V CHCl = 1 ∶2 ～ 2 ∶1 的凹形梯度洗脱为最佳洗脱方式的结论 ,其洗脱剂用量仅为柱体积的 3 3 5～6 倍 ,洗脱时间为 6 h 左右. 　　关键词 :色谱法 ;卵磷脂 ;分离 　　中图分类号 : TQ645. 9 + 6 　　 文献标识码 :A 　　有关卵磷脂色谱分离方面的研究 , 国外有报道[ 1] ,但其洗脱方式局限于恒定组分洗脱和阶段洗脱 ,致 ( ) ( ) 使洗脱时间长 需十几个小时 ,洗脱剂用量大 是柱体积的几十倍 . 在洗脱剂的选择方面 ,采用的是正己 烷/ 甲醇混合液. 由于正己烷与甲醇不互溶 ,造成了洗脱过程中洗脱剂组成变化波动大 ,洗脱效果不理想. 针对这些情况 ,笔者主要从洗脱剂组成和洗脱方式上对卵磷脂的色谱分离进行探索 , 旨在以尽量少的洗脱 时间和洗脱剂用量达到满意的分离效果. 1 　实验部分 1. 1 原料与试剂 ( ) ( ) ( ) ( ) 　　卵磷脂粗品 市售 . 氯仿 AR 、甲醇 AR 、硅胶 200 目 . 1. 2 仪器及设备 ( ) ( ) ( 　　色谱柱 1. 5 cm ×40 cm 、恒流泵 HL - 2 ,上海青浦仪器厂 、紫外检测仪 ZT - P ,通力实验检测仪器 ) ( ) ( ) 厂 、记录仪 XWD1 - 100 ,上海 自动化仪表三厂 、自动部分收集器 BSZ - 160 ,上海青浦仪器厂 . 1. 3 实验方法 ( ) 　　 1 卵磷脂粗品的初步处理. 将卵磷脂粗品溶于 3 份乙醇中 ,过滤 ,滤渣再用 3 份乙醇溶解. 如此反复 操作 3 次 ,合并滤液 ,将滤液浓缩到原体积的 1/ 10 . 用丙酮研洗 2～3 次 ,真空干燥. ( ) 　　 2 色谱法分离卵磷脂. 将经过初步处理的