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实验五 微生物细胞的大小测定 一、目的要求 1.学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法; 2.了解目镜测微尺和镜台测微尺的原理; 二、实验器材及用品 1、菌种: 酵母菌 2、仪器或其它用具: 目镜测微尺，镜台测微尺，显微镜。 三、基本原理 微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小，只能在显微镜下测量。用来测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片。一般将1mm等分为100格，每格长度等于0．01mm（即10μm）。是专用于校正目镜测微尺每格长度的。 目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，有等分50小格或100小格两种，每5小格间有一长线相隔。由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才可用来测量微生物的大小。 四、操作步骤 1、装目镜测微尺 2、校正目镜测微尺 （1）放镜台测微尺 将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。 （2）先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰的看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占格数。用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，分别测出在高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所占格数。 （3）计算 由于已知镜台测微尺每格长10um，根据公式 目镜测微尺每格长度（um）=两条重合线间镜台测 微尺的格数×10/两重合线间目镜测微尺的格数 即可分别计算出在不同放大倍数下，目镜测微尺 每格所代表的长度。 低倍镜下-------倍目镜测微尺每格长度为---------- 高倍镜下-------倍目镜测微尺每格长度为---------- 油镜下----------倍目镜测微尺每格长度为---------- 3、菌体大小测定 先用低倍镜和高倍镜找到标本后，换高倍镜测定酵母菌的直径。测定时，通过转动目镜测微尺和移动载玻片，测出酵母菌直径或宽和长所占目镜测微尺的格数。最后将所测得的格数乘以目镜测微尺每格所代表的长度，即为该菌的实际大小。 注意事项 1、镜台测微尺的玻片很薄，在标定油镜时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头； 2、标定目镜测微尺时，一定要准确对正目镜测微尺与镜台测微尺的重合线。 五、实验报告 1.将目镜测微尺校正结果填入表格中; 2.在高倍镜下测量酵母菌的大小,填入表格中; 3.思考题:为什么更换不同放大倍数的目镜和物镜时必须重新用镜台测微尺对目镜测微尺进行标定? * * 显微测微尺