应用PCR-DGGE分析发酵床养殖仔猪消化道菌群多样性及其演替.pdfVIP

第38卷第3期 家畜生态学报 V01．38NO．3 Acta AnimalisDomastici Mar．2017 2017年3月 Ecologiae 应用PCR—DGGE分析发酵床养殖仔猪 消化道菌群多样性及其演替 柳尧波1，傅建功2，任素芳3，郭立辉3，张玉玉3，刘玉庆3 (1．山东省农业科学院农产品研究所，山东济南250100；2．山东省栖霞市畜牧兽医站，山东烟台265300； 3．山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东济南250100) d和42d仔猪消化道各段 [摘 要] 利用PCR—DGGE技术研究了发酵床和水泥地养殖21 茵群多样性和相似性，结果表明，饲养全程中仔猪胃中茵群种类较少，经胃酸等抑制作用，回肠 中茵群最少；之后，茵群迅速增殖，盲肠、结肠中茵群种类较多。相比于水泥地，发酵床提供了 稳定而丰富的菌群和稳定的温湿度，能够持续增加消化道两端的胃和结肠中的茵群多样性，促 进回肠茵群演替为稳定的盲肠茵群；全程保持较高比例的乳酸茵属，一定程度上抑制或减缓弯 曲茵属、志贺菌属、埃希氏菌属生长增殖，有利于构建和维护仔猪消化道正常菌群，对于提高仔 猪健康和生产性能是一种较为理想的养殖方式。 [关键词]PCR—DGGE；发酵床；仔猪；消化道茵群 [中图分类号]$811．5 [文献标识码]A [文章编号] 发酵床养猪技术是在猪舍内利用自然菌群发酵 72日龄)，每组各屠宰三头仔猪，用无菌载玻片刮取 垫料，原位处理粪尿等排泄物，实现养猪无污染和 胃、回肠、盲肠及结肠四个部位的消化道粘膜约2g mL “零”排放的一种新的环保型养猪模式[1。2]。发酵床放于灭菌5mL离心管中，剪碎后，加入l。5 养猪具有降低污染和改善猪舍环境，提高仔猪日增 GTE mg／ 重和饲料转化率，并改善猪肉品质的优点D。4]。有关 L)，37℃放置2h，每隔15min涡旋混匀一次，利用 该技术提高猪生产性能机理的探讨多从外在因素分 析，关于该饲养方式对仔猪肠道微生物菌群影响的 于无菌TE缓冲液，通过微量核酸测定仪(NANO DRoP 研究较少。本文应用PCR—DGGE技术比较分析了 2000)测定其浓度，一20℃贮存备用。 1．3 16SrDNA 发酵床和水泥地面两种养殖模式下仔猪消化道各段 基因组总DNA 细菌多样性，揭示了发酵床技术对消化道微生物菌 以消化道粘膜的总DNA为PCR反应模板， 群种类和各肠段菌群演替的影响。 16S 7一CGC CCGGGGCGCGCCCCGGGCGGGGCGGGG 1材料与方法 GCACGGGGGGACTCCTACGGGAGGCAG 1．1试验动物及分组 CAG一37)和UN518rev：(57一ATTACCGCGGCT GCT CCGGGGCGC 选择饲养在产床上，30日龄断奶的杜长大三元