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DNA的结构和DNA的复制 第三课时 DNA的复制 叶县三高 吕国奇 * 科恩伯格的实验 科恩伯格设想,细胞内必有合成DNA所需的酶。于是他把大肠杆菌磨碎,用其提取液加上4种脱氧核苷酸,其中至少有一种进行放射性同位素标记,以便于检查实验结果,再加一点点微量DNA作为“模板”(比如小牛胸腺DNA)。把上述混合液在有鎂离子存在的条件下于37?C静置30min,发现放射性标记已进入DNA部分,说明有新合成的DNA分子。新合成的DNA分子用过滤沉淀法提纯后,科恩伯格测定了产物DNA的碱基组成,发现它们同模板DNA组成惊人相似。 从实验中得到的启示 ⑴DNA可以复制吗?实验中哪些信息支持这个结论? ⑵DNA复制需要哪些原料? 如果不加入“模板”DNA,新DNA可以合成吗? 我们的问题 这个实验说明了DNA复制的微观过程吗? 如果没有你能根据所学过的知识设计一个DNA复制的模型吗? 当时科学家设计的模型又是什么呢?。 科学家的模型 ①全保留复制模型:作为模板的DNA的两条母链分开,分别复制形成两条DNA子链,此后两条母链彼此结合,恢复原状,新合成的两条子链彼此互补结合形成一条新的双链DNA分子。 ②弥散复制模型:亲代DNA双链被切成双链片段,而这些片段又可以作为新合成双链片段的模板,新、老双链又以某种方式聚集成“杂种链”。 ③半保留复制:在复制过程中,原来双螺旋的两条链并没有被破坏,它们分成单独的链,每一条旧链作为模板再合成一条新链,这样在新合成的两个双螺旋分子中,每个分子中都有一条旧链和一条新链。 同学们想一想,DNA复制到底是一个什么样的过程?我们能否根据我们所学知识设计一个实验来验证科学家的猜想? 提示:DNA是肉眼看不到的,如何才能分辨出哪个DNA原来就存在的,还是新形成的呢?。 科学家的实验 1957年美国的米西尔森和斯塔尔采用稳定的同位素15N作DNA标记,15N可以导致DNA分子密度显著增加这样可以通过密度梯度离心将不同的DNA分子区分开来。 同学们想一想;如果两条链都用15N标记的DNA分子与用14N 标记的DNA分子相比哪一条较轻,离心的话哪一种在底部? 科学家实验 第一步; 他们将大肠杆菌放在含有15N的培养基上培养,获得实验用的亲代细菌(这样做的目的是什么?), 使亲代的DNA双链都标记上15N(双链均为重链),提取DNA进行CsCl梯度离心,结果只有一条带位于离心管底部。 第二步;将持续生长的后代放在含14N的培养基中培养,让其再繁殖一代,取子代DNA进行CsCl离心。 请同学们预测一下 ①如果DNA复制是全保留复制,离心结果如何? ②如果DNA复制是弥散复制,离心结果如何? ③如果DNA复制是半保留复制,离心结果如何? 实验结果 实验结果显示离心管中部只出现一条带。 这一步实验结果否定了哪一个实验模型? 科学家的实验 第三步;将第二步所得到的大肠杆菌放入含14N的培养基中培养,得到子二代,然后提取DNA进行CsCl梯度离心。 同学们预测一下,如果是弥散复制会是什么结果?如果是半保留复制又是什么结果? 真实结果 实验的结果是离心管中有2条带,比例相等,一条位于上部,一条位于中部。 实验结果支持三个模型中的哪一个? 如果实验继续进行第四步,让大肠杆菌在14N培养基上再复制一代,提取DNA进行CsCl梯度离心,结果会如何?离心管内有几条带?比例如何? 我们能不能设计一个实验来进一步验证半保留复制的真实性 为了验证DNA半保留复制的真实性,又把第一代的杂种链经变性分开(使两条链分离成单链),然后再将变性前后的双链和单链分别进行梯度离心。 实验结果该如何呢? DNA分子复制的过程 1、DNA分子复制过程发生在细胞的那一时期? 2、DNA复制的半保留复制是怎样的呢? 通过下面的图片和动画让我们总结出来。 阅读课本P63~64,找出复制的概念、时间、条件、过程、结果、意义。看与我们的总结是否一致。 概念:是指以 母链DNA 为模板合成 子代DNA 的过程。 时间:有丝分裂间期、减数分裂第一次分裂间期。 条件:模板、原料、酶、能量。 过程:DNA解旋、分别以两条链为模板边解旋边复制,复制过程严格遵循碱基互补配对。 结果:形成两个新的DNA分子 意义:使遗传信息从亲代传给子代 练习 1、用标记有15N的一个双链DNA分子,在14N的培养液中进行两次复制后,其后代的DNA分子单链中,含14N和15N的比值为( ) A、 1:1 B、2 :1 C、3:1 D、4:1 2、下列关于DNA分子复制的叙述中,正确的是( )
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