Caco_2细胞模型验证指标的选择与评判.pdf

Caco2细胞模型验证指标的选择与评判 ( ) 蔡润兰 , 王敏 , 齐云 , 王翔岩 , 谢忱 , 罗秀珍 中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所 , 北京 100 193 摘要 : 目的　建立 Caco2细胞模型并探讨验证该模型指标的选择与评判 。方法 　在所建立的 Caco2单层细胞模型上 , 通过 测定跨上皮细胞膜电阻 ( TEER ) , 比较膜两侧碱性磷酸酶 (AL P) 活性 , 计算几种公认的标记物在单层模型转运参数等对 Caco2细胞单层可靠性进行评价 。结果 　TEER 在细胞单层形成过程中稳定增长 , 膜两侧培养液中 AL P活性差异逐步加大 , 细胞旁及跨细胞转运标记物均呈现可预见的低或高表观渗透系数 ( Papp ) 值 , Pgp 标准底物非索非那定双侧转运流出率 ( ER ) 大于 2。结论 　建立的 Caco2细胞模型在完整性 、细胞极性 、通透性以及 Pgp 表达等方面均符合 胃肠吸收化合物机 制研究的要求 。 关键词 : Caco2细胞 ; 跨膜电阻; 碱性磷酸酶 ; P糖蛋白 中图分类号 : R965　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 1001 - 2494 (2008) 24 - 1871 - 05 Selection and Utiliza tion on the Eva lua tion C r iter ion s of Caco2 C ell M odel CA I Runlan , WAN G M in , Q I Yun , WAN G X iangyan , X IE Chen , LUO X iu zhen ( Ins titu te of M ed icina l P lan t D evelopm en t, Ch inese A cadem y of M ed ica l S ciences and P ek ing Un ion M ed ica l Colleg e, B eij ing 100 193, Ch ina) A BSTRACT: O BJECT IVE　To estab lish and validate Caco2 cell mono layer model M ETHOD S 　Caco2 cell monolayer wa s evaluated by determ in ing tran sep ithelial electrical re sistance ( TEER ) , comp aring b ilateral AL P activity, and tran sporting standard m arkers in modelRESUL TS 　TEER and the difference of b ilateral AL P activity were increa sed in cell monolayer develop ing p rocess, and the app aren t p erm eab ility coefficients( Papp ) of the m arkers of p aracellu lar and tran scellu lar tran sport were all w ith in the reported range The efflux rate of fexofenadine ( the standard sub strate of Pgp ) wa s above 2 CO NCL US IO N　The integrity and p erm eab ility o