Biolog微生物自动分析系统_丝状真菌鉴定操作规程的研究.pdf

生产与科研经验 Biolog 微生物自动分析系统 ———丝状真菌鉴定操作规程的研究 姚 　粟 　程 　池 　李金霞 　胡海蓉 ( 中国食品发酵工业研究院中国工业微生物菌种保藏管理中心 ,北京 ,100027) 摘 　要 　Biolog 微生物自动分析系统是美国Biolog 公司研制开发的新型自动化快速微生物鉴定系统 , 目前我国 已有多家科研单位 、高校和生物企业引进该鉴定系统 ,但多用于细菌鉴定 ,应用于丝状真菌鉴定的研究未见报道 。 该系统用于丝状真菌鉴定是以微生物对 95 种碳源利用的特异性和利用碳源增殖后产生的浊度变化为基础 。文 中基于 Biolog 丝状真菌鉴定的验证实验 ,参考 Biolo g 系统操作手册和国家微生物资源平台技术规程的统一格式 , 研究制定了丝状真菌鉴定操作规程 ,有利于提高Biolo g 鉴定系统鉴定丝状真菌的应用水平 。 关键词 　Biolog 微生物自动分析系统 ,丝状真菌鉴定 ,操作规程 　　随着分子生物学 、微生物学和光电、色谱等技术 株, T . v i ri de 1 株 和 T . harz ian u m 37 株 。该研究 的发展和计算机的广泛应用 ,丝状真菌的鉴定逐渐由 显示 ,应用 Biolog 系统对 T richoder m a 属中某些相近 传统的形态学观察发展进入了分子生物学鉴定和基 种的鉴定还有待进一步验证研究 , 同时将形态学观 于仪器的快速 自动化分析鉴定阶段[ 1 ] 。丝状真菌的 察 、Biolog 碳源利用情况分析和分子生物学 r RNA 序 鉴定过去一直依赖传统的形态学观察研究 , 由于观察 列分析结合起来应用于 Trichoderma 属的鉴定会取得 人员的专业背景和经验不同 ,不可避免地带来人为因 更好的鉴定效果[5 ] 。 素而引起的误差 ,而且部分菌种仅从形态学观察无法 Biolog 鉴定系统利用丝状真菌对不同碳源代谢 进行准确鉴定 。丝状真菌的分子生物学 I TS158S 率的差异 ,筛选 95 种不同碳源 ,通过检测微生物细胞 - I TS2 序列分析鉴定已经被大多研究者所采用 ,并 利用不同碳源进行新陈代谢过程中产生的氧化还原 取得了良好的鉴定结果[2 ,3 ] 。近年来 ,美国Biolog 公 ( ) 酶与显色物质发生反应而导致的颜色变化 吸光度 司推出的Biolog 微生物快速 自动化分析系统也逐渐 ( ) 以及由于微生物生长造成的浊度差异 浊度 ,与标准 应用于丝状真菌 的分析鉴定 : 美 国环境保护组织 菌株数据库进行比对 ,得出鉴定结果[6 ,7 ] 。同时 , 鉴 Hobbie 利 用 Biolog 系 统 对 土 壤 中 的 A sp erg il l us 定系统还提供近 800 张宏观和显微图片供形态学参 f l av us , Cryp tococcus albi d us , Fus ari u m oxysp or u m , 考 ,见图 1 。 H u m icol a g risea , M ort ierel l a sp . , Penicil l i u m arenicola , P . l iv i d u m , P . sp i n ulos u m 和 R hodotor