培养基模拟灌装试验.ppt

培养基模拟 灌装试验 无菌的概念 什么是无菌? 理论上：无菌＝没有任何活的微生物 实际上：我们无法证明产品中没有活微生物存在 无菌的概念 “无菌”的实际定义: ??经生长和繁殖证明无生物 ??实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 最终灭菌无菌制剂：微生物存活的概率达到10-6，即保证一百万个已灭菌物品或制剂中存活的微生物数低于一。 非最终灭菌无菌制剂：目标是零生长，但在污染率低于0.1%，可信度在95%时是可以接受的。 什么是污染率低于0.1%？ 计算公式：实际污染率 = (95%置信限值)/(灌封容器数) × 100% 培养基灌装试验的批量与判断合格的标准 无菌检查的局限性 风险：结合了发生危害的可能性和危害的严重性 风险评估 非最终灭菌制剂的风险大不大？ 我们如何做到上述的无菌保障水平 无菌生产工艺 什么是无菌生产工艺？ 无菌生产工艺 产品、容器和密封件分别进行灭菌，然后进行灌封 在极高洁净环境下进行灌装和密封 产品在最终容器中不再做进一步的灭菌处理 对各个组成部分的灭菌工艺需要进行严格验证和监控 在灌封前和灌封过程中的操作会带来污染风险 什么是无菌生产工艺？ 生产环境 洁净区 人员 药液制备和过滤 药液除菌过滤前的微生物负荷 过滤器完整性测试和验证 生产设备和内包装材料的准备和灭菌 灌装过程 无菌工艺过程验证 什么是无菌生产工艺？ 作业环节与风险 无菌操作最重要的部分 个人认为是 所有操作人员的无菌保障意识 为什么需要进行培养基灌封试验？ ※无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点。 ※减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施。 ..人员培训 ..无菌工艺验证 定义 使用培养基模拟药品进行无菌灌封，对无菌工艺进行验证。又称为“工艺模拟试验”. 目的 证明生产线采用无菌工艺生产无菌产品的能力 对人员进行资格确认 符合GMP的要求 试验前的准备工作 设备确认 通风系统（HVAC）、水系统的验证 设备的清洗和消毒CIP,SIP 灭菌工艺验证 湿热、干热灭菌工艺 除菌过滤的验证 空气过滤器的完好性检测 容器/胶塞密闭性测试 人员培训 洁净室环境达到设计要求 培养基灌装的原则 通常情况下，应该包括产品实际操作过程中可能发生的“最差条件” 必须考虑可能采取那些干预措施 ? 最差条件 ??高于或低于正常范围的条件限度，与正常生产条件相比最有可能造成工艺或生产失败的条件。 ??注意 ??如果某些做法会带来污染的风险，则不允许用培养基灌封的结果为它的不合理的进行辩护。 培养基灌装方案 需要考虑的关键因素 : 起始步骤 试验的次数和频率 培养基及培养条件 灌装数量 容器体积 灌装体积 灌装速度 培养基灌装方案 灌装过程的持续时间 人员和工作班次 环境监测措施 干预措施 容器的检查 培养方法 可接受标准 污染调查 关键因素一:起始步骤 新版GMP第四十八条：。。。应尽可能模拟常规的无菌生产工艺，并包括所有对结果有影响的关键生产工序。。。 1、从配制开始：冻干制剂从液体配料开始，需要更多量的培养基，考察的最全面。（如工艺要求配好的液体需要在配制罐中蒸汽灭菌的应从配制开始） 2、从除菌过滤前开始：考察的内容包括除菌过滤系统，考察较全面，培养基不需要灭菌，需要考虑生物负荷。 3、从除菌过滤后面开始：只考察灌封等操作过程，培养基需要事先灭菌。 关键因素二: 试验的次数和频率 培养基模拟试验的初始验证，至少需要成功的连续进行 3 次独立的模拟试验（建议在不同的工作日进行试验）。 首次验证后，培养基模拟试验通常每年进行2次，每次进行1批即可。 当生产线发生变更，并且经过评估可能对无菌生产工艺有潜在危险时，应当进行额外的培养基灌装试验。 关键因素三: 培养基及培养条件 (1/3) 培养基必须适应广谱微生物的生长，包括需氧菌、酵母菌和霉菌（非选择性培养基）。 较好的澄明度，较小的粘度，易于除菌过滤。 推荐使用大豆消化酪素琼脂培养基(SCD) ，以及大豆胰蛋白胨肉汤(TSB)。 如果产品在缺氧条件、通常在氮气保护下灌装时，或在环境中分离出厌氧菌时，可能需要使用厌氧培养基:液体硫乙醇酸盐培养基(FTM)。 关键因素三: 培养基及培养条件 (2/3) 培养基必须做促生长试验，按药典方法（10版药典新规定）进行评价。有条件的推荐使用1~2种最常见的环境分离菌。 促生长试验可以同步或14天培养后进行。用于促生长试验的培养基培养前需经过同样的工艺步骤（例如清洗、灭菌、充氮、灌装、冻干等） 通常情况，在培养结束后，一些玻璃瓶（从生产开始、中间、结束时取样）进行微生物接种。