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补精益肾颗粒提取工艺的优选的论文.doc
补精益肾颗粒提取工艺的优选的论文
作者:刘小辉,郭立玮,潘林梅,沈强
【摘要】 目的 优选补精益肾颗粒的最佳提取工艺。方法 采用正交试验设计,以淫羊藿苷的提取率作为评价指标,分别对影响提取效果的加水量、提取时间以及提取次数3个因素,选择3个水平进行考察。结果 最佳提取工艺为提取2次、加水量分别为10倍量和8倍量、提取时间各为1.5 h。结论 该工艺稳定可行。
【关键词】 补精益肾颗粒;正交设计;淫羊藿苷
abstract:objective to investigate the process of best extraction for bujing yishen granules. methods the orthogonal test ployed for selecting the best extraction process, ount, extracting time and times es amount of e, then adding 8 times and 1.5 hours for the second time. conclusion the method is stable, reasonable and feasible.
key ule;orthogonal design;icariin
补精益肾颗粒是由淫羊藿、太子参等药味制成的中药复方制剂,具有补气健肾之功效,临床主要用于治疗男性不育症。.淫羊藿为方中君药,主要含淫羊藿苷等黄酮类成分和多糖。鉴于淫羊藿苷等的有效成分极性较大,为保证该药中有效成分的提取,本制剂宜采用水煎煮方式提取。为优选其提取工艺,以提取液固形物得率和淫羊藿中淫羊藿苷作为指标,采用正交设计法对主要影响提取效果的加水量、提取时间、提取次数3个因素,选择3个水平进行考察。
1 仪器与试药
erck公司生产),水为超纯水,其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 因素水平
对影响提取效果的加水量(a)、提取时间(b)、提取次数(c)3个因素分别取3个水平安排实验,因素水平见表1。选用l9(34)表进行试验安排,正交试验设计及结果见表2。表1 因素水平表(略)表2 水提取l9(34)试验表(略)注:淫羊霍苷提取率=(提取液中淫羊霍苷含量/投料药材中淫羊霍苷含量)×100%。
2.1.1 吸水率考察[1]
将淫羊藿等处方药材适当粉碎,称取处方一半量药材50 g(3份)混合,加水500 ml浸泡,隔一定时间观察浸透心程度。至全部透心时,吸水率为2%。
根据处方量称取淫羊藿、太子参等药材,共9份,每份重100 g,按表2安排试验,煎煮提取,每份提取液减压浓缩至约100 ml,精密移取10 ml置50 ml量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,采用淫羊藿苷的含量测定方法用hplc法测定。
2.1.2 水浸出物测定
精密量取上述正交试验的提取液20 ml,于干燥至恒重的表面皿(in,冷却后,立即称重(m×250 mm);流动相:乙腈-水(28∶72);流速:1.0 ml/min;检测波长:270 nm;柱温:30 ℃;aufs=0.5。
2.2.2 对照品溶液的制备
精密称取105 ℃干燥至恒重的淫羊藿苷对照品5.06 mg,置于5 ml容量瓶内,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀。精密吸取1 ml置于10 ml量瓶内,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为0.101 2 mg/ml淫羊藿苷对照品溶液。
2.2.3 供试品溶液的制备
按处方比例称取淫羊藿、太子参等处方中的药材共100 g,加水提取2次,每次提取1.5 h,合并2次提取液,提取液经过高速离心之后,精密吸取该提取液1 ml,置于5 ml容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得供试品溶液。
2.2.4 阴性对照试验
按处方比例称取除淫羊藿以外的药材,按“2.2.3”项下方法制备阴性样品液及阴性对照溶液。分别吸取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各5 μl,进样,按“2.2.1”项色谱条件测定,结果阴性无干扰。
2.2.5 线性关系考察
精密吸取淫羊藿苷对照品溶液2、4、6、8、10、12 μl,注入液相色谱器仪中,测定峰面积。以进样量为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,经线性回归,回归方程为:y=5 864 392.0x-897.5,r=0.999 4。由测定结果提示,淫羊藿苷进样量在0.202 4~1.214 4 μg范围内线性关系良好。
2.2.6 精密度试验考察
分别精密吸取同一供试品溶液5 μl,连续进样5次,结果所得淫羊藿苷含量的rsd=1.58%。
2.2.7 重复性试验考察
取5份同
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