第四章 植物胚胎培养与人工种子.pptVIP

第四章 植物胚胎培养与人工种子;第一节 植物胚胎培养;植物胚胎结构;一、胚胎培养概念;胚电镜扫描图片;双子叶植物胚 ;3、胚乳培养 指处于细胞期的胚乳组织的离体培养。;不同植物的胚珠形态结构;倒生胚珠 ; 5、子房培养 指授粉和未授粉的子房培养。它对于研究果实发育的生理、离体受精等有重要意义。 6、试管受精 指在无菌条件下培养离体的未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌发产生的花粉进入胚珠而完成受精过程。;二、胚胎培养的应用; 指在无菌条件下将胚从胚珠或种子中分离出来，置于培养基上进行离体培养的方法。;植物胚结构;胚电镜扫描图片;双子叶植物胚 ;幼胚培养 成熟胚培养 ;（一）幼胚培养 幼胚完全是异养的，离体条件下培养要求培养基成分复杂，培养不易成功。 幼胚培养时，其发育过程有以下几种发育方式： a、胚性发育，此种方式不能萌发成苗 b、早熟萌发，长成的苗十分瘦弱 c、产生愈伤组织，再由愈伤组织分化形成胚或不定芽;（二）成熟胚培养 成熟胚是自养的，培养基需要简单。主要目的: ◆研究胚发育过程的形态建成 ◆生长调节物质的作用 ◆胚与胚乳相互关系和营养要求;培养方法： A、将受精后成熟或未成熟种子或果实，用70%—75%酒精表面消毒消毒几分钟 B、用0.1%升汞溶液或饱和漂白粉溶液消毒10min，无菌水反复冲洗 C、无菌操作台上，直接或在解剖镜下剥取胚接种在培养基上; 胚龄; 胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的3倍体组织。由它可获得无子结实的3倍体植株，进而可将它加倍成6倍体植株。 不同胚乳发育类型及发育时期直接影响外植体取材时期以及胚乳细胞产生愈伤组织频率。 胚乳培养的后代，常发生细胞染色体数目变化，形成多倍体、非整倍体等。;1、核型胚乳　◆被子植物中普遍的胚乳发育形式 ◆初生胚乳核的第一次分裂和以后的多次分裂，都不伴随壁的形成 ◆各个胚乳核呈游离状态分布在胚囊中 ◆发育到一定阶段后，常在胚囊外围的胚乳核之间出现细胞壁??? ◆为单子叶植物和具有离瓣花的双子叶植物中普遍存在，如小麦、水稻、玉米、棉花、油菜、苹果等 ;;2、细胞型胚乳特点： ◆初生胚乳核的分裂开始，即产生细胞壁，形成胚乳细胞 ◆无游离核时期 大多数双子叶合瓣花植物是这样的胚乳，如番茄、烟草、芝麻等。;;3、沼生目型胚乳 ◆核型胚乳与细胞型胚乳的中间类型 ◆初生胚乳核的第一次分裂将胚囊分隔为两室，其中珠孔端室比合点端室宽大 ◆核进行分裂形成状态的游离核，最后形成细胞 ;;（二）胚乳培养的关键;★ 旺盛期胚乳特征 §胚已分化完成 §胚乳已形成细胞组织 §充分生长，达到成熟大小 §外观为半透明的固体状 §富有弹性;水稻：授粉后4 d 黑麦草：授粉后8 ~ 10 d 黄瓜：授粉后7 ~ 16 d 梨：授粉后20 d 大麦：授粉后10 ~ 20 d 玉米和小麦：授粉后8 ~ 12 d;B、培养基和激素的影响 培养基：MS、B5、MT、White、LS等 水解酪蛋白、酵母提取物也很必要 激素：要求特殊 大麦胚乳只有在添加2，4-D的培养基上才能生长 猕猴桃胚乳培养中，玉米素最好 枣的胚乳培养中，激素似乎无特殊要求;C、其他因素的影响 蔗糖浓度：3% ~ 5% 温度：25℃ pH值：如 玉米 6.1 ~ 7.0 ； 苹果 6.0 ~ 6.2等 ;（三） 培养方法： A、取授粉4-8d后的幼果，常规消毒 B、无菌条件下切开果实，取出种子，分离出胚乳 C、接种在培养基上，在25-27℃和黑暗条件或散射光下培养形成愈伤组织 D、转到分化培养基上，待愈伤组织长出芽后，切下不定芽 E、插入生根培养基中，光下培养10-15d，切口处长出白色的不定根;※两种植物胚乳培养的方法 A、枸杞;B、葡萄; 未授粉胚珠和子房培养是离体受精的基础，可诱发大孢子发育成单倍体植株，且孤雌产生的单倍体植株获得率较孤雄生殖高。 胚珠培养中，已授粉具有球形胚或更后期的胚珠易培养成种子，且培养基