利用保护剂及抑菌剂延长生物肥料保存期的筛选研究.pdf

团二蠹◇icj}艿黑丸弘省学术年会论文枭 利用保护剂及抑茵剂延长生物肥料 保存期的筛选研究 吴皓琼①牛彦波⑦张晓彦③郭立姝④ 摘要：在微生物茵剂中加入4％的糖蜜、2％的麸皮可显著提高制剂的保存期。在同等条件下， 与对照组相比。固氮茵的保存期可提高至12个月以上，磷细菌的保存期可提高1倍以上；在 以未灭茼的草炭作为栽体的微生物制剂中。同时添加4％糖蜜、2％麸皮及2‰~4‰苯甲酸钠、 O．5％一1‰的多茵灵。与对照相比，制剂的保存期可提高50％以上。 关键词：茵荆；微生物肥料；保存期；抑茵剂 目前，我国微生物肥料行业生产的产品存在较多问题，诸如有效活菌含量低，杂 菌率偏高，有效期短等，影响了市场的开拓和农民的使用的积极催¨。关于载体对菌剂质 量影响的研究已有报遭2．33，而保护剂与抑菌剂对微生物菌剂活菌数量的影响还未见报 道。作者选择不同的保护剂及抑菌剂，研究了它们对微生物菌剂活菌数量及保存期的影 响，希望研究结果能够对生物肥料生产厂家有一定的参考价值。 一、材料 (一)菌种 解磷巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium P01、P02)、硅酸盐细菌 (Bacillusmucilagnosus K05、K07)、 联合固氮菌(AlcaligenesfaecalisN002、 KlebsiellapneumoniaeN003)，生产用菌株自编号，本组分离保藏。青霉、根霉、米曲霉，本组 从肥料样品中分离保藏。 (二)试荆 所用试剂均为化学纯或分析纯。 二、方法 (一)菌剂的制备 将活化好的巨大芽孢杆菌、联合固氮菌、硅酸盐细菌斜面分别接种子灭菌的肉汤、阿 须贝(加酵母粉1．09)等液体培养基中41，28℃180r／min振荡培养36h-48h。 (二)栽体的处理 选择草炭、褐煤作为载体，过80目筛，草炭用CaO调pH至中性，121 oC灭菌1—2h。 (三)保护剂的筛选 选择蔗糖、玉米粉、糖蜜、麸皮、饼粉等作为微生物肥料保护剂的筛选对象。将处理过 的玉米粉、麸皮、糖蜜、饼粉以及蔗糖等按照一定配比加入到培养好的菌剂发酵液中，充 分混匀后，按5％的比例，添加到草炭、褐煤等载体中并使样品含水量在30％一35％左 右，放置24h测定初始菌数。阴凉处放置30d后，测定活菌数，以未添加保护剂的处理为 对照(CK)。共设7个处理，见表1。 (四)添加保护弃lj对微生物茵荆有效活茵数及保存期的影响 将选定的保护剂按一定比例加入到培养好的发酵液中，混匀，以10％的比例接种到 H目LoNGJIANGsHE№×uEsHuNIANHuI山NwE^ul约口艿 灭菌的载体中调水分，密封室温保存。放置24h测定初始菌数，每隔1—2个月测活菌数， 同时以未加保护剂的处理为对照(CK)。 (五)抑茵剂对固氮茵、磷细茵、钾细菌生长的影响 采用钢圈法。在钢圈中加入苯甲酸钠(2‰、4％o、6‰水溶液)、多菌灵(11800、111200、 111500、1／2000悬液)，每组处理3次重复，28℃培养48h，观察有无抑菌圈出现，如无抑制 反应为阴性，以“一”表示，有抑制以“+”表示，强度为：强++++、较强+++、中等++、弱+。 (六)多茵灵对霉菌抑制能力的测定 在PDA(4)培养基平板上，分别加入青霉、根霉、米曲霉菌悬液0．05ml涂布均匀后等 分加入灭菌钢圈，在钢圈中分别加入多菌灵(11800、111200、111500、1／2000悬液)3次重 复。28℃培养5—7d，观察多菌灵对上述各霉菌的抑制程度，如无抑制，以“一”表示，有抑 制以“+”表示，强度为：强++++、较强+++、中等++、弱+。 (七)苯甲酸钠、多茵灵同时添加对微生物菌剂的影响 在固氮菌、磷细菌、钾细菌的发酵液中分别按2％o、4％o、6％o比例加入苯甲酸钠，混匀 后，以10％的比例加入到未灭菌的草炭中，在草炭中以0．2％比例人为加入霉菌制剂，而 后再以I％o、2‰的比例加入多菌灵，混匀，放置30℃温箱培养24h(以促进霉菌孢子的萌 发)取出测定，6d后再测定有效活菌总数及霉菌数，以不加抑菌剂的处理为对照(CK)，试 验处理设定如下： 处理l(CK)：只含固氮菌、磷细菌、钾细菌混合发酵液，无抑菌剂。 处理2：在处理1基础上加l‰多菌灵、2‰苯甲酸钠。 处理3：在处理l基础上加1％o多菌灵、4％瘴甲酸钠。 处理4：在处理1基础上加1‰多菌灵、6‰苯甲酸钠。 处理5：在处理1基础上加0．5％0多菌灵、2％瘴甲酸钠。 处理6：在处理1基础上加0．5％。多菌灵、4％o苯甲酸钠。 处理7：在处理1基础上加0．5％0多茵灵、6％瘴甲酸钠。 。 (八)测定方法矿冀 活菌数、杂菌数的测定为平板法(5)。 i咖：； (九)结果与讨论 ／，“。； 1．保护剂的筛选试验 ；：。：i 结果见表2。从表2可知，添加保护剂