2013基工程复习题.doc

2013 基因工程复习题 名词解释 基因工程工具酶 限制作用 修饰作用 限制性核酸内切 3′粘性末端 平端 的切割频率 同裂酶 同尾酶 DNA分子的限制性图谱 限制性核酸内切酶识别位点 DNA连接酶 Taq DNA聚合酶 RNAase H 质粒载体（L型，OC型和CCC型） 聚合酶的FIDELITY（错误率 精确度） 复制子 质粒 F因子 R质粒 Col质粒 拷贝数 冠瘿碱 多克隆位点（MCS） 质粒的不相容（不亲和） 严紧型 孙驰型 cⅠ基因 cos位点 柯斯质粒 SV40的潜伏期 人工染色体 随机引物 串联启动子表达载体 cDNA文库 目的基因 基因组文库 双启动子表达载体 文库筛选 表面显示技术 噬菌体显示文库 套式PCR (nested PCR) 反向PCR (inverse PCR) 不对称PCR (asymmetric PCR) 锚定PCR (anchored PCR) 长程PCR (long and accurated PCR) 反转录PCR (RT-PCR) Alu PCR 锚定引物 转座子标签法 T—DNA标签法 工合成接头 实时荧光定量PCR的基线，阈值，Ct值和DNA0 同聚物加尾法 DNA衔接物 转化分子信标 农杆菌 DNA的变性和复性 Southern印迹 电穿孔(electroporation) Northern印迹 转基因受体细胞 感受态细胞 外植体 转导(transduction) 共培养 脱菌培养 显微注射法 阳性克隆子 PLac和PTac表达系统 PL和PR表达系统 T7表达系统等 包涵体蛋白 “外排” “分泌” 穿梭载体 自主复制顺序(ARS) 2um质粒 愈伤组织 遗传病 基因诊断 RFLP连锁分析 基因治疗 嵌合体抗体 ex vivo 基因治疗 in vivo 基因治疗 单克隆抗体 锌指酶 人源化小鼠抗体 in situ基因治疗 回文对称的结构，反向重复序列 简述题目 II型限制性核酸内切酶的特点 限制性核酸内切酶的命名原则，以Eco RI为例说明 单克隆抗体治疗疾病的原理是什么？ 基因治疗载体有哪些？各都有什么特征？ 体细胞基因治疗和生殖细胞基因治疗各有哪些特点？ 同源重组单交换和双交换对所转DNA来说各自能造成什么后果？ 锌指酶如何构建？有什么功能？ 自杀基因策略基因治疗方案的原理是什么？ 世界上第一例基因治疗是大致是如何进行的？效果如何？ 影响限制性内切核酸酶的效率有哪些因素？ 限制性内切酶活性单位的定义 什么是新星活性，如何避免： DNA连接酶可以连接DNA的缺刻。那么它可以连接单链的DNA吗？ DNA连接酶用什么作为辅助因子？ T4-DNA多核苷酸磷酸激酶的活性有哪些？ 哪种活性可用于放射性标记核酸5′末端的0H基？用那种底物？ 末端转脱氧核苷酸移酶（TdT）的活性是什么？ 可用于哪些重要的反应？ T7和SP6RNA聚合物的活性是什么？它在基因工程有什么样的应用？ 常用的两种反转录酶是什么？在基因工程中主要用它的那个活性？ 大肠杆菌DNA聚合酶全酶有哪些活性？有哪些基本用途？ Klenow片段有哪些活性？可用于哪些反应？ T4 DNA聚合酶有哪些活性？基本用途是什么？ 基因工程中，碱性磷酸酶的活性用途是什么？常用的碱性磷酸酶有哪几种？各有什么特点？ S1核酸酶活性？可用于哪些反应？ 大肠杆菌质粒载体常用的抗药性 组成质粒载体的最基本遗传元素有哪些？ α—互补作用 Ti质粒 为什么可将冠瘿瘤细胞分为章鱼碱型、胭脂碱型和农杆碱型肿瘤细胞？ Ti质粒的T-DNA的功能是什么？ 温和噬菌体生活周期的裂解周期和溶源性周期 插入型λ噬菌体载体载体和取代（置换）型载体的区别 pBR322和pUC名称怎么来的？ λ噬菌体载体的应用 λDNA的体外包装 M13噬菌体载体的特点 SV40-DNA的早期转录和晚期转录 SV40病毒的基础分子生物学 人工染色体是如何构建的？ 如何利用SV40病毒元素构建载体？为什么有时要辅助病毒？ 随机文库是什么？如何确定随机文库的大小？随机文库的大小和什么因素有关？ 基因组文库的特点？ 为什么说cos基因文库转化后在平板上出现的是菌落而不是噬菌斑？ cDNA合成常用的随机引物有哪几种？ 强烈变性剂如盐酸胍或硫氰酸胍溶液处理细胞的目的是什么？ 文库的免疫杂交筛选 RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends) 表达序列标签法（简称EST） 人工接头（DNA寡核苷酸连杆） DNA（探针，质粒等）的常用方法有哪些？ 实时荧光定量PCR的用途是什么？