白芍中芍药甙的含量测定.doc

白 芍 中 芍 药 甙 的 含 量 测 定 原 理 “白芍”为《中国药典》1995年版一部收载品种。白芍的主要化学成分为单萜及其甙：芍药甙（paeoniflorin）3.3~5.7%，并含少量羟基芍药甙，苯甲酰芍药甙等[1]。《中国药典》该品种[鉴别]项下，用薄层色谱法鉴别其含有的芍药甙，本文用薄层扫描法测定白芍中芍药甙的含量。 样品、试剂及仪器 样品： 香港市场商品 对照品： 芍药甙（paeoniflorin） 中国药品生物制品检定所提供 试剂： 硅胶G（60型）（青岛海洋化工集团公司出品 国家药典会监制， 批号：95 14） 乙醇，氯仿，醋酸乙酯，甲醇，甲酸，硫酸，香兰素等（均为分析纯） 仪器： 手动薄层涂布器（DESAGA） CAMAG点样器Nanomat III CAMAG双槽展开箱 CAMAG薄层扫描仪（SCANNER 3） CAMAG薄层色谱摄像仪（REPROSTAR II） 供试液制备 取本品粉末约2g，精密称定，置回流瓶中，加入乙醇于水浴上回流三次，每次40ml，1小时，放冷，过滤，滤液蒸干，残渣用甲醇溶解并移入2ml容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 白 芍 中 芍 药 甙 的 含 量 测 定 对照品溶液制备 取芍药甙对照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作为对照品溶液。 色谱条件 薄层板： 硅胶G薄层板（20·10cm） 硅胶G60F254预制板（Merck）（20·10cm） 点样： 用CAMAG点样器Nanomat III点状点样 展开； 以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）为展开剂，展开约8cm，取出，晾干。 显色： 喷以显色剂[（1）取水25ml，缓慢加硫酸50ml，放冷后，再加乙醇25ml，摇匀；（2）8%香草醛无水乙醇溶液；用时将（1）（2）两溶液混合按5：1，冰箱中保存]后，在80oC加热7~10分钟，至斑点显色清晰。 测 定 光源： 钨灯 扫描用计算机软件： CAMAG CATS 4.04 扫描方式: 反射法吸收扫描，波长：(s=580nm。 扫描速度： 20mm/秒 扫描时间： 10分钟（18个扫描道，优化扫描） 积分时间： 手铺板：屏幕积分16分钟 预制板： 屏幕积分16分钟 计算： 直线回归 测 定 结 果 手铺板: 预制板: 白 芍 中 芍 药 甙 的 含 量 测 定 讨 论 本试验的关键在于显色和相对湿度的控制。显色剂宜新鲜配制，喷雾要均匀，显色温度和时间注意控制；显色后应马上扫描，否则芍药甙斑点会逐渐退色。CAMAG公司的新型扫描仪（SCANNER 3），具有快速测定的优点（18个扫描道2~3分钟测定完毕），减少了因测定时间过长而造成的测定误差。相对湿度较大时，样品色谱图分离度较好，湿度应控制在88%。[2] 预制板较手铺板的斑点集中、整齐，扫描基线平稳，因而，两份测定结果较接近。 参考文献： [1] 《生药学》徐国钧主编 人民卫生出版社 第181页码 《中华人民共和国中药薄层色谱彩色图集》谢培山主编 广东科技出版社 第39页 广州市药物检测研究所 试验责任人：谢培山