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* 1.3 同工酶(isozyme)的调节 来源: 组成:由两个或两个以上亚基构成的寡聚酶。 合成过程: 原级功能酶(基因性同工酶) ——直接由编码基因表达而产生的同工酶; 次生同工酶(翻译后同工酶) ——多肽链经翻译后加工、组合而成的同工酶。 举例: (AK, LDH) M型 H型 LDH同功酶谱 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) LDH由H型和M型两型亚基构成的四聚体、五种同工酶。 LDH1(H型):对丙酮酸亲和力低(Km大), 对乳酸亲和力大; 运动时,心肌可利用乳酸氧化产能; LDH5(M型): 对丙酮酸亲和力高(Km小), 运动时,骨骼肌可以加强糖酵解产生乳酸,补充能量; 乳酸经过血循运至心肌组织利用。 LDH同工酶谱临床诊断意义: 心肌梗塞: 血清LDH1↑; 肝癌或急性肝炎: 血清LDH5↑; 白血病: 血清LDH4↑ 意义: 同工酶的存在,不仅使调节更加精细、更加合理; 而且使临床诊断更加特异、更加灵敏.。 1.4 酶蛋白的酶促化学修饰调节 1.4.1 化学修饰机理 磷酸化修饰 磷酸化 使酶蛋白分子中 Ser-OH、 Thr-OH和Tyr-OH发生磷酸化修饰; Ser / Thr蛋白激酶 Tyr蛋白激酶 去磷酸 在另外的磷酸酶作用下脱去磷酸,使酶恢复原型。 1.4.2 酶促化学修饰特点: (1)极大多数受化学修饰的酶,有无活性和有活性两种形 式,并受不同的酶催化而互变; (2) 化学修饰使酶蛋白发生共价键的变化 (3)磷酸化修饰是一种耗能较少的经济有效的调节方式; (4)级联式的激活过程,对调节信号有快速、放大效应。 Gs 1.5 钙调蛋白(又称钙调素,Calmodulin, CaM) 是一种与Ca2+结合、并将Ca2+信号下传的一类钙结合 蛋白。 1.5.1 钙调蛋白的分布 分布广泛,但脑组织内含量最高; 在细胞内,胞浆中含量最高; 1.5.2 钙调蛋白的分子结构 CaM: 148个aa、17KD、单链,热稳定,耐酸, 分子内含(30%)酸性氨基酸,pI ? 4.0, 282nm有吸收高峰——可作为鉴定CaM的条件之一。 CaM分子中有4个 结合Ca2+的结构域: Ⅰ— 8 ~ 40, Ⅱ— 44 ~ 76, Ⅲ— 81 ~ 113, Ⅳ— 117 ~ 148: (CH3)3-Lys115 ; 能使肽链高度扭曲,增加CaM与靶酶的亲和力。 1.5.3 Ca2+·CaM活性复合物 静息状态时, 胞内[Ca2+] ? 10-7mol/L; 细胞受到外界刺激后, 胞内[Ca2+] ↑ → 10-6mol/L, CaM + n Ca2+ CaM* ·( Ca2+)n (n: 1~4) (无活性) (有活性) CaM* ·( Ca2+)n + E E*· CaM* ·( Ca2+)n 1.5.4 CaM* ·( Ca2+)n 的调节作用 (其下游靶蛋白或酶有20多种) CaM* ·( Ca2+)n 磷酸二酯酶(PDE)
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