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真核细胞DNA的特征: 1.重复顺序 (1)高度重复顺序:基础顺序含5~100bp,重复次数在106~107次(卫星DNA)。 (2)中度重复顺序:基础顺序为300bp左右,重复次数在几百~几千次(如组蛋白基因,rDNA,tDNA)。 (3)单一顺序(真核中除组蛋白外,其它所有蛋白质都是由DNA中单一序列决定的)。 2.间隔顺序与插入顺序 真核细胞DNA中,除了编码蛋白质和RNA的基因序列片段外,还有一些片断不编码任何蛋白质和RNA,它们可存在于基因与基因间,也可存在于基因内。前者称为间隔顺序,后者称为插入顺序。 内含子:基因内的插入顺序; 外显子:编码蛋白质的基因顺序。 3.回文结构 以一假想的轴成180°旋转对称 如: T-A-G-C-T-A-T-A-G-C-T-A A-T-C-G-A-T-A-T-C-G-A-T 1.DNA碱基组成的规律 1)A + G = T + C 2)A = T 3)G = C *2.B-DNA双螺旋特点: 1)反向平行右手双螺旋 10bp/圈;螺距:3.4nm; 直径:2.0nm。 2)脱氧核糖、磷酸在螺 旋的外侧(极性) 3)碱基对在螺旋的内侧、 碱基互补:A—T G—C 4)维持键: (1)氢键(横向) A=T G≡C (2)碱基堆积力(纵向) Watson-Crick double helix model 三、DNA的三级结构(tertiary structure ,超螺旋) 1.定义:DNA分子在双螺旋的基础上进一步盘曲形 成的超螺旋。 2.分类: 1)原核生物DNA超螺旋:麻花状 2)*真核生物DNA超螺旋:核小体: 组蛋白八聚体 [ 2(H2A+H2B+H3+H4)] + 140~145bp 1)原核生物DNA超螺旋:麻花状 2)真核生物DNA超螺旋: 核小体: 组蛋白八聚体 [ 2(H2A+H2B+H3+H4)] + 140~145bp 一、 RNA一级结构的共同特点 (1)基本组成单位NMP,一般含较多种类的稀有碱基核苷酸; (2)每分子RNA中含几十至数千个NMP,彼此也通过3′5′磷酸二酯键连接成多核苷酸链; (3)RNA主要是单链结构,局部形成双螺旋; (4)RNA易被碱水解,DNA则在碱中稳定。 1.tRNA 占全部RNA的15%左右,含有较多的稀有碱基,是细胞中最小的RNA; 2.mRNA 含量占RNA总量的3~5%,代谢很不稳定。 3.rRNA 占全部RNA的80%左右,代谢稳定,分子量最大,存在于核蛋白体内; 1.tRNA *“三叶草”型结构 tRNA三级结构:倒置L型 2.mRNA 3.rRNA 原核细胞rRNA包括: 5SrRNA 、23SrRNA 16S rRNA + 蛋白质 + 蛋白质 核糖体(70S) = 大亚基 + 小亚基 真核细胞rRNA包括:5S 、 5.8S 、 8SrRNA 18S rRNA + 蛋白质 + 蛋白质 核糖体(80S) = 大亚基 + 小亚基 第五节 核酸的理化性质 一、一般理化性质 (二)紫外吸收: 二、核酸的变性、复性与与分子杂交 (一)核酸变性(denaturation) 1. 定义: 在某些因素的作用下,核酸中双链间氢键断裂, DNA双螺旋以及RNA局部双螺旋结构解开,形成 无规则线团状分子的过程。 1)增色效应 2)粘度降低 DNA熔解温度(melting temperature ,Tm) (二)核酸复性 (renaturat
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