水培和生理指标测定-.doc

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水培前种子的处理 把种子置于灭菌三角瓶中(第1天) ↓(水洗1min) 换成70%乙醇 ↓(摇晃5min,不能太激烈) 水洗2次,每次1min ↓ 换成15%次氯酸钠 ↓(5min) 水洗3次,每次1min ↓ 培养皿(双层滤纸)室温 ↓ 等种子基本露白,放4度冰箱 ↓ 点种子 注意:PEG处理的要多点种子,因为处理后的叶子变蔫,质量变小。 Hoagland培养液 100×微量元素 1L 2L H3BO3 309.2mg 0.6184g MnCl.4H2O 198mg 0.396g ZnSO4.7H2O 23mg 0.046 g CuSO4.7H2O 9.98mg 0.01996 g (NH4)6MoO24.4H2O 2.48mg 0.00496 g 100×铁盐(Fe2+)(以下用一个就行) C10H12O8M2Na2Fe 1.954g/L C10H12O8M2NaFe 1.839g/L 1×大量元素 KH2PO4 136.09mg/L KNO3 505.5 mg/L Ca(NO3) .4H2O 1.18 g/L MgSO4.7H2O 492.94mg/L 20×大量元素 KH2PO4 2721.8 mg/L KNO3 10110 mg/L Ca(NO3) .4H2O 23.6 g/L MgSO4.7H2O 9858.8 mg/L 8×大量元素 PH5.8_6.0(KOH调) 1L 2.5L 4L KH2PO4 1.0887g 2.72175g 4.3549g KNO3 4.044g 10.11g 16.176g Ca(NO3) .4H2O 9.44g 23.6g 37.76g MgSO4.7H2O 3.9435g 9.8587g 15.774g 注意:KH2PO4、KNO3、Ca(NO3) .4H2O溶完后再加MgSO4.7H2O 实验中常用酸碱的质量密度与浓度的关系 名 称 分 子 式 相对质量 质量密度 (Kg / L) 百分浓度 ﹪(w/w) 量浓度C(粗略) ( mol·L-1 ) 配1升1mol·L-1溶液所需数(ml) 盐 酸 硫 酸 硝 酸 冰乙酸 乙 酸 磷 酸 氨 水 氢氧化 钠溶液 HC1 H2SO4 HNO3 CH3COOH CH3COOH H3PO4 NH3稨2O 36.47 98.09 63.02 60.05 98.06 35.05 40.0 1.19 1.18 1.10 1.84 1.18 1.42 1.40 1.20 1.05 1.075 1.71 0.90 0.904 0.91 0.96 1.5 37.2 35.4 20.0 95.6 24.8 70.90 65.3 32.36 99.5 80.0 85.0 27.0 25.0 10.0 50.0 12.0 11.8 6.0 18.0 3.0 16.0 14.5 6.1 17.4 14.3 15.0 15.0 14.3 13.4 5.6 19.0 84 56 63 59 69.93 67 67 70 53 Pro含量的测定 在逆境条件下(旱、盐碱、热、冷、冻),植物体内脯氨酸(proline,Pro)的含量显著增加。 用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中,然后用酸性茚三酮加热处理后,溶液即成红色,再用甲苯处理,则色素全部转移至甲苯中,色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波长下比色,从标准曲线上查出(或用回归方程计算)脯氨酸的含量。 试剂1. 酸性茚三酮溶液:将1.25g茚三酮溶于30ml冰醋酸和20ml6mol/L磷酸20ml 6mol/L磷酸磷酸中,搅拌加热(70)溶解,贮于冰箱中;2. 3%磺基水杨酸:3g磺基水杨酸加蒸馏水溶解后定容至100ml;3. 冰醋酸;4. 甲苯。 实验步骤 1. 标准曲线的绘制 (1)在分析天平上精确称取25mg脯氨酸,倒入小烧杯内,用少量蒸馏水溶解,然后倒入250ml容量瓶中,加蒸馏水定容至刻度,此标准液中每ml含脯氨酸100μg。 (2)系列脯氨酸浓度的配制取6个50ml容量瓶

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