诊断畜禽寄生虫病的一种新技术.doc

诊断畜禽寄生虫病的一种新技术 　　多年来，我们研究了一种定性、定量检测寄生虫病的新技术，包括新虫卵计数器（已获国家专利）、操作程序、每克粪中虫卵数计算公式、对被检粪便采 样量、粪便沉淀液的稀释体积和技术的可行性（即 在粪便沉淀液中难以分布均匀的蛭形巨吻棘头虫虫 卵、片形吸虫虫卵的分布均匀性进行了测定）进行了研究，并进行了临床试验检验，结果表明本技术用于定性、定量检测诊断寄生虫病是可靠的。 　　1 新虫卵计数器制作 　　在一张2mm厚的载玻片上画2个1cm 2 的方格，在每个方格内，每间隔1mm 画1根直线（避免虫卵的重复和遗漏计数），然后用3根1mm 厚的玻璃条分别粘在两方格的中间和两边，再 将另一张 1mm 厚的玻片粘在玻璃条上，形成两个计 数室，即一个计数室的体积为 0.1mL ，见 图1。 　　2 其它器具 　　显微镜、秤（天平或其它小计量秤）、量筒、容器（烧杯、塑料杯或铁盅等均可）、铜筛网、 移液管。 　　3 操作程序 　　3.1 定量秤取被检家畜粪便（检测片形吸虫病时，最少被检羊粪便为 4.7g 、牛粪便 27.5g ），用定量粪便的3～5倍体积水调成糊。 　　3.2 用铜筛网过滤，并用适量水边冲洗边过滤。 　　3.3 将滤液沉淀30min（检测较大虫卵如片形吸虫 虫卵、前后盘吸虫虫卵、棘头虫虫卵等的沉淀时间为15～20min ，检测球虫卵囊等的沉淀时间为1h ）;弃上清液，再加水沉淀，重复3次。检测单个样品时， 建议将沉淀改为离心，以便缩短操作时间。 　　3.4 弃适量上清液，用量筒量取该沉淀液量（每g 被检羊粪便沉淀液为5～10mL ，每g被检牛粪便沉淀液为3～5mL ）。 　　3.5 充分摇匀沉淀液后（肉眼见到粪渣在粪便沉 淀液中均匀即可），用移液管迅速将部分沉淀液移 至“计数器”的两计数室内。 　　3.6 在显微镜下，观察计数器两计数室内的寄生虫 虫卵，并计数。 3.7 按以下公式计算EPG（每克粪中虫卵数）值。 　　EPG= 计数器两计数室内的虫卵总数×YmL（粪便沉淀液体积）Xg（粪便重量）×0.2 　　4 临床印证 　　用本寄生虫病诊断监测新技术对178 只怀孕绵羊（之前已有3只怀孕绵羊因片形吸虫病死 亡）的片形吸虫病病情程度进行诊断，有26只怀孕绵 羊的片形吸虫虫卵的EPG值在300以上。选用肝蛭 净（Fasinex）治疗这26只绵羊，治疗后第8天检测，17 只怀孕绵羊的片形吸虫虫卵转阴率为100%，其余9 只怀孕绵羊的片形吸虫虫卵EPG值减少率为 86.7% ～96.4% 。在其后5个月的持续观察期内，这178只 怀孕种绵羊中没有一只因片形吸虫病死亡。此结果 表明，应用该寄生虫病诊断监测新技术， 对以往采用 的检测技术检获的EPG较小而危害性大的片形吸 虫病的诊断检测没有发生误诊或漏诊。 　　5 适用范围 　　本技术适合于检测诊断几乎所有经 粪便排虫卵或卵囊的寄生虫病，在用于临床诊断中 已经检测出的寄生虫虫卵见表1。 表1 新诊断监测技术的试用情况（略） 　　6 应用这项新技术检测有关寄生虫虫卵的部分研究报告例举如下。 　　6.1 Liao Dangjin. Study on the new egg count tech- nique for M. hirudinaceus and A. suum . Veterinary Parasitology， 1996，61:113―117. 　　6.2 廖党金.绵羊与牛片形吸虫病的粪便检测新技术.中国兽医寄生虫病，2000，8（4）:18―22. 　　6.3 廖党金，张华贵，黄德恩，等.怀孕绵羊片形吸虫病病情程度的诊断和治疗试验.中国兽医杂志， 1999，25（4）:17―18. 　　6.4 骆家锐，徐文福，俄木阿迁，等.绵羊片形吸虫病和线虫病病情程度的检测与治疗试验.中国兽医寄生虫病，2003，11（4）:46―48. 　　6.5 廖党金，向丕元，杨光希，等.规模化养猪的寄生虫病控制技术探讨.四川畜牧兽医，2003，30（增 刊）:51―52. 　（四川省畜牧科学研究院，成都 610066） 规模化养猪场寄生虫病控制新技术探讨