脂质体磁性复合纳米颗粒的制备与发展杨文清123513.docx

脂质体磁性复合纳米颗粒的制备与应用杨文清 123513摘要：造影剂辅助的核磁共振成像是目前肿瘤诊断的最好方法之一。但是由于核磁共振成像内在的低灵敏性以及造影剂的非特异性，导致肿瘤早期诊断较为困难。文章将一种新的肿瘤靶向核磁造影剂纳米粒子应用于早期肿瘤的影像诊断。这种新的肿瘤靶向核磁造影剂纳米粒子由配体转铁蛋白(Tf)、纳米水平的正电脂质体(Lip)载体和临床常用的造影剂Magnevist(TfNIR-LipNBD-Magnevist)三部分构成。另外转铁蛋白和脂质体粒子上，亦标记了荧光物质用于确定转铁蛋白．脂质体．造影荆纳米粒子的靶向性，以及肿瘤的光学影像诊断。关键词：肿瘤诊断；脂质体；纳米颗粒；磁性；靶向一、引言在科学技术飞速发展的时代，新的技术和新的理论不断涌现和完善。这些技术和理论快速地向各个领域渗透，给人类社会带来新的生机，推动社会向前发展。21世纪对社会发展最具影响力的技术是生物技术、信息技术和纳米技术。率先发展起来的生物技术和信息技术已渗透到人们生活的各个领域，为大众所熟悉；而上世纪90年代才发展起来的纳米技术却仍然披着神秘的面纱，等待着人们去探索、去完善。纳米技术(nanotectmology)是指在纳米尺度空间内操纵原子和分子，对材料进行加工，制造出具有特定功能的产品或对物质及其结构进行研究，掌握其原子和分子运动规律和特性的一门综合性的技术体系。Eric Drexler教授在1986年首次正式提出纳米技术一词，对纳米技术的发展起了指导性作用。目前纳米技术已涉及从农业到医药，从基础到临床，从诊断到治疗，从纳米生物材料到人工器官、机器人各个方面，进而向诊断和治疗的微创、微型、微量、快速、实时、遥距、动态、智能化方向发展。纳米医学是纳米科技的一个新分支，是运用纳米科技的理论与方法，在传统医学和现代医学的基础上，开展医学研究与实践的新兴边缘学科。在医学领域中，纳米科技已经得到成功的应用，最引人注目的是作为药物载体和传感器载体。纳米药物载体研究始于30多年前，但一直受制于基础研究进度，产业化基础不成熟，到了上世纪90年代后才逐步走向市场，现在正呈加速发展状态。目前中国的纳米药物载体技术的产业化进程比较快，不久的将来就可有纳米医药产品问世。而其中最具有发展潜力和市场前景的是以纳米脂质材料制成的药物载体。脂质纳米粒用作药物载体具有下述显著优点：(1)载药脂质纳米粒作为异物而被巨噬细胞吞噬，到达网状内皮系统分布集中的肝、脾、肺、骨髓、淋巴等靶部位；连接有配基、抗体、酶底物所在的靶部位。(2)到达靶部位的载药脂质纳米粒，可有载体材料的种类或配比不同而具有不同的释药速度。调整载体材料种类或配比，可投资药物的释放速度，制备出具有缓释特性的载药脂质纳米粒。(3)由于载药脂质纳米粒的粘附性及小的粒径，即有利于局部用药时滞留性的增加，也有利于药物与肠壁的接触时间与接触面积，提高药物口服吸收的生物利用度。(4)可防止药物在胃酸性条件下水解，并能大大降低药物与胃蛋白酶等消化酶接触的机会，从而提高药物在胃肠道中的稳定性。(5)载药脂质纳米粒可以改变膜运转机制，增加药物对生物膜的透过性，有利于药物透皮吸收与细胞内药效发挥。随着靶向药物的不断发展，科学家希望通过特异性生物分子介导，合成出一类具有肿瘤靶向性的造影剂，以进一步降低核磁共振成像技术的检测极限，用于肿瘤的早期诊断。肿瘤靶向造影剂主要由配体、造影剂载体和造影剂三部分构成。从理论上讲，由于肿瘤表面抗原过度表达，肿瘤靶向造影剂可以特异性地聚集在肿瘤细胞表面，从而增强微小肿瘤病灶的核磁信号，实现肿瘤早期诊断。文献报道，纳米尺度的阳离子脂质体(Lip)可被用作药物或基因治疗的载体。在脂质体的表面修饰上如叶酸、转铁蛋白（tf）或抗肿瘤表面抗原抗体等靶向配体，就可以特异性引导造影剂到达癌细胞。用于肿瘤靶向的靶向基团一般需要具有体积小、毒性低、对肿瘤特异性结合能力强、无免疫原性等特性。肿瘤靶向脂质体粒子不但能选择性地运载药物或基因到癌细胞，而且更增加了脂质体的转染效率。转铁蛋白受体在许多肿瘤，包括口腔、前列腺、乳腺、胰腺等癌细胞表面呈现高表达。比如，有研究表明在74％的乳腺癌、76％的肺腺癌、93％的肺鳞癌中转铁蛋白受体呈现高表达。且转铁蛋白受体的表达水平与肿瘤的增长速度及预后成正比。因此，近年来基于转铁蛋白的肿瘤靶向药物研发十分活跃，转铁蛋白、转铁蛋白受体的抗体、或单链抗体片段等被用来做靶向的基团。本文利用阳性脂质体粒子、转铁蛋白和临床上使用的核磁造影剂Magnevist构建了转铁蛋白．脂质体．Magnevist肿瘤靶向纳米粒子(tfNIR-LipNBD-Magnevist)，来增强核磁共振影像的对比度，用于肿瘤的早期诊断。为了研究方便，我们还在转铁蛋白上标记了近红外荧光物质。在实验中，采用光学成像的方