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【选修一】 复习归纳
一、培养基的成分:
1、培养基概念:给生物 (植物、动物组织或细胞、细菌、真菌和病毒) 的生长、繁殖提供营养的液体或固体。
2、微生物的培养基: 营养成分包括 ①碳源(供碳元素的有机物或无机物)、②氮源(供氮元素的有机物或无机物)、③水、④无机盐
二、微生物培养基的制作过程:
①根据培养对象
1、细菌培养基:
(1)成分: 蛋白胨 + 酵母提取液 + NaCl + 水 (PH: 一般要求中性偏碱的环境)
(2)类型:
①LB固体培养基(加琼脂或琼脂糖)
a、 培养皿中固体平板培养基:用于划线分离或稀释涂布分离微生物。
b、试管固体斜面培养基:用于保存菌种)
②LB液体培养基(不含琼脂):常用于菌种的扩增繁殖或工业生产。
③分离含脲酶的微生物培养基: 尿素、葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红(作为指示
剂)、琼脂糖(不含氮)、水(要点:只能以尿素作为唯一的氮源)
2、真菌培养基: 蔗糖+豆芽汁+无机盐 (PH: 一般要求中性偏酸的环境)。若要培养酵母
菌,则可只要葡萄糖溶液即可
3、生产果酒:
(1)苹果果酒:苹果汁、蔗糖(加入蔗糖的目的有:①有利于酵母菌的繁殖 ②能提高果酒的酒精浓度)
(2)葡萄酒:葡萄、蔗糖溶液 (用于扩增酵母菌,标志是排出气泡CO2 )
4、生产果醋:果酒、水 (醋杆菌吸附在锯末上、空气测6、植物组织培养的培养基 ( MS培养基): 水分、大量元素、微量元素、有机成分(如蔗糖、
甘氨酸、肌醇等)。
注意:①蔗糖并维持渗透压灭菌灭菌
(3)操作环境 (超净台) 和双手要消毒 (70%酒精擦拭)
(4)菌种的转移接种要在超净台中酒精灯的火焰旁进行
(5)实验结束时,培养用过的培养基一定要经过高压蒸汽灭菌后才能倒掉。
五、几种消毒或灭菌的方法:
1、一般的培养基(耐高温)、器皿:高压蒸汽灭菌(121 0C、1 Kg/cm2 、15 min)
2、培养基中含葡萄糖:为了防止葡萄糖高温分解碳化,要用500g/cm2 、90 0C、30min。
3、尿素固体培养基: 培养基经121 0C下灭菌后,冷却至60 0C时,再将尿素溶液通过G6玻璃漏斗过滤加入。G6玻璃砂漏斗过滤在使用前也要在121 0C下用纸包好灭菌。
4、超净台灭菌: 打开紫外灯和过滤风在0、涂布器(即玻璃刮刀)灭菌:保存在70%乙醇中,使用时放在酒精灯火焰上,等到刮刀上的火焰熄灭。
六、微生物的分离和计数问题:
1、划线分离法
(1)优点:操作方法简单
(2)不足:菌落不容易分开,分离效果差的
②划线的10-4、10-5),取0.1mL不同稀释度的菌液,加在培养基的固体表
面,用玻璃刮刀涂布在培养基平面上,然后进行倒置培养。②每种稀释度涂三个平板。
③通常以每个培养皿有20个以内的单菌落最为合适。
(4)溶液中微生物数目的换算: 平板上菌落平均数×稀释倍数×(溶液的体积除以0.1mL)
七、微生物分离的意义:
单菌落的分离是消除杂菌污染的通用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简单方法之一。
八、选修—7.5,最适温度50--75 0C。
一、微生物的名称及培养的最适条件
1、大肠杆菌培养的最适温度_____________
2、有一些细菌含有_________,可通过降解尿素作为其生长的氮源。取土样时,从______________________的地方取。
3、有些微生物,如______________________等都可用于生产果胶酶。
4、α-淀粉酶可从______________提取。其作用的最适pH为_________,最适温度为____________
5、制作果酒时,___________(微生物)在_________条件下进行发酵,该过程会产生___________
6、制作果醋时,____________(微生物)在_________条件下,将_________氧化为___________。
7、腌制泡菜时,是在_______条件下________________(微生物)利用菜中的糖和其他营养物质进行发酵,发酵产物有____________________等,其中也有少量的
1、LB液体培养基________________
2、接种环________________
3、无菌水________________
4、玻璃刮刀_______________
5、超净工作台_____________
6、尿素固体培养基_________________
7、外植体_________________,
归纳:不同灭菌方法的适用对象
1、高压蒸汽灭菌法_______________________________
2、灼烧灭菌法__________________________
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