化生专业微生物-第4章-病毒(上传)--精.ppt

病毒和亚病毒 Viruses and Subviruses Chapter 4 — 1 – 病毒（Viruses） 一、病毒的发现 （The discovery of viruses） 二、病毒的主要特点 （General features of viruses ） 三、病毒的类型（Types of viruses） 1、根据核酸类型（based on nucleic acid） 2、根据宿主（based on host） 四、病毒的形态结构和成分 1、病毒的大小和形状（size and shape） 2、毒粒的结构（structure of virus particle ） 3、毒粒的化学组成（chemical composition） 4、病毒的群体形态 五、病毒的繁殖（Multiplication） 1、烈性噬菌体的增殖周期 （productive cycle） 2、噬菌体的效价（titer） 3、一步生长曲线（one step growth curve） 4、温和噬菌体的溶源性反应 （lysogeny of temperate phage） 六、病毒的培养和纯化 （Culturing and purification） 1、培养（culturing） 2、 病毒纯化（purification） Chapter 4 — 2 – 亚病毒（Subvirus） Chapter 4 — 3 – 病毒与实践 （3）增殖（replication） 包括核酸和蛋白质的生物合成：噬菌体以核酸中的遗传信息向宿主细胞发出指令并提供“蓝图”，使宿主细胞的代谢系统按严密的时序性转向合成噬菌体的组分。 T4噬菌体的时序性生物合成 （4）装配（maturity） 新合成的毒粒结构组分组装成完整的病毒颗粒，称做病毒的装配，亦称成熟。 （5）释放（release） 当宿主细胞内的大量子代噬菌体成熟后，由于脂肪酶和溶菌酶等的作用，细胞裂解，子代噬菌体释放。 效价：每毫升试样中所含有的具有侵染性的噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位数（plaque-forming unit，pfu）。 测定效价常用双层平板法（two layer plating method）。 定量描述烈性噬菌体生长规律的实验曲线称为一步生长曲线。 一步生长曲线反映了每种噬菌体的3个最重要的特征参数：潜伏期（latent phase） 、裂解期（rise phase）和裂解量（burst size）。 自病毒在受染细胞内消失到细胞内出现新的感染性病毒的时间为为隐蔽期（eclipse phase） 。 潜伏后期，胞内出现了感染性病毒，为胞内积累期（intracellular accumulation phase）。 （1）潜伏期（latent phase） （2）裂解期（rise phase） 病毒粒子只有个体装配而没有个体生长，再加上宿主细胞裂解的突发性，理论上裂解期是瞬时出现的，但事实上由于群体细胞中各个细胞的裂解并不同步，所以出现了较长的裂解期。 （3）平稳期（plateau） 指感染后宿主细胞已全部裂解，溶液中噬菌体效价达到最高点的时期。 平均每一宿主细胞裂解后产生的子代噬菌体数称为裂解量（burst size）。 温和噬菌体（temperate phage）侵入相应宿主细胞后，基因组整合到宿主基因组上，并随宿主的复制而进行同步复制，因此，这种温和噬菌体的侵入并不引起宿主细胞裂解，称为溶源性或溶源现象。 温和噬菌体的生活史 二元培养物法 噬菌体 细菌培养物 培养液 营养琼脂平板 细菌培养液变清亮 细菌平板成为残迹平板 出现病变 出现痘疱 细胞聚集、出现空斑 动物病毒 实验动物 鸡胚 多种细胞培养 植物病毒 敏感植物叶片 产生坏死斑，或称枯斑 （1）标准（standards） 纯化的病毒制备物应保持其感染性 病毒是有感染性的生物体 病毒具有化学大分子的属性 纯化的病毒制备物的理化性质应具有均一性 蛋白质提纯方法 盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、 凝胶层析、离子交换等 （2）方法（methods） 主要化学组成为蛋白质 具有一定的大小、形状和密度 差速离心 梯度离心 凡在核酸和蛋白质两种成分中，只含其中之一的分子病原体，称为亚病毒，包括类病毒（Viroid）、拟病毒（Virusoid）和朊病毒（Prion）3类。 * * 微生物学第4章 类病毒 Viroid 拟病毒 Virusoid 朊病毒 Prion