.季花药培养.ppt

* 注：花粉细胞核内有染色体，染色体主要由DNA和蛋白质组成，醋酸洋红为碱性染色剂，染色体容易被染色。通过染色，可以确定细胞核为单核期还是双核期，是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 * 课题2 月季的花药培养 花中皇后月季又称“月月红”，自然花期5至11月，开花连续不断 ，通常扦插就可以成活。 知识回顾 单倍体育种的过程？ 花药离体培养（N） 单倍体植株（N） 秋水仙素处理，使染色体翻倍 植株（2N） 特点：1 明显缩短育种年限 2 后代植株都为纯合子。 正常植株（2N） （一）被子植物的花粉发育 （1）被子植物定义：凡是种子有果皮包被着，胚珠有子房壁包被着的植物，就叫做被子植物（绿色开花植物） 1、 被子植物和裸子植物 （2）裸子植物定义：凡是胚珠裸露，外面没有子房壁包被，种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物（无真正意义上的花） 实例：玉米、大豆、梨、杏 实例：松、杉、柏 一、基础知识 花药 花丝 （一） 被子植物的花粉发育 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉 （一）被子植物的花粉发育 雄蕊 花药 药隔：花药中部，由薄壁细胞构成，内有 维管束（疏导组织） 花粉囊（4或2个） 表皮 纤维层 （4）被子植物的花粉发育 ①经历时期： 四分体时期、单核期、双核期等阶段 ②花粉发育过程： 由花粉母细胞经过减数分裂形成的单倍体的生殖细胞. 花粉的概念: 小孢子母细胞（花粉母细胞） 减数分裂 4个小孢子（小孢子四分体时期） 1个小孢子（单核居中期）：这时的细胞含有浓 厚的原生质，核位于细胞中央称为单核居中期 ②花粉发育过程： 4个单倍体细胞连在一起，进入单核期时（四分体的4个单倍体细胞彼此分离，各自形成具有4个单细胞核的花粉粒） 有丝分裂 1个小孢子（单核靠边期）：随着细胞不断长大，细胞核由中央移向细胞一侧称为单核靠边期 双核期 生殖细胞核 生殖细胞 有丝 分裂 2个精子 （基因型相同） 花粉管细胞核 营养细胞 两个精子和一个营养核的基因型相同 生殖细胞核与花粉管细胞核基因型相同； 注意： ①二核花粉粒：成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） 4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 1花粉母细胞 ③ ②三核花粉粒：有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个花粉管细胞核和两个精子。 2N N N N 1、关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（ ） A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央 BD 注：花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒，每个花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞核，每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。 （二）产生花粉植株的两种途径 ① ② 移栽 花药中的花粉 胚状体 脱分化 愈伤组织 花药中的花粉 脱分化 分化 丛芽 再分化 丛芽 诱导 生根 体细胞胚（胚状体）：在组织培养过程中，某些细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构，发育过程亦与合子胚类似 原因：培养基中的激素种类及浓度配比 部分花药通过胚状体途径形成小植株 烟草花药培养 胚状体发育途径 愈伤组织转接种到再生培养基 愈伤组织分化形成再生植株 水稻花药培养 愈伤组织发育途径 部分花药产生愈伤组织 接种在平板上的水稻花药 诱导花粉植株能否成功及诱导成功率的高低，受多种因素影响，其中材料的选择与培养基的组成是主要影响因素。 （三）影响花药培养的因素 选材是否成功是花药培养成功的关键 （1）选材 1、材料的选择： ①不同植物的诱导成功率很不相同； ②同一种植物的生理状况对诱导成功率也有直接影响： 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。 一般月季的花药培养时间选在5月初到5月中旬，即月季的初花期。 （2）花药培养时期的选择： 合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素 ①原因：因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。 （三）影响花药培养的因素 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。 ②花药时期选择： 单核靠边期。 选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣松动，又给材料的 消毒困难，且难以挑选到单核期的花