十一、凝血功能检查.pptVIP

实验十一　APTT、PT、FDP、D-二聚体测定 APTT Ca2+ 脑磷脂 鞣花酸 Ca2+ 脑磷脂 部分凝血活酶 PT 组织因子 Ca2+ 磷脂 凝血酶 TT 二、材料 1、半自动血凝仪、水浴箱、塑料试管、 秒表 2、 APTT： 4%鞣花酸-脑磷脂悬液 0.025mol/L氯化钙溶液 PT ：0.025mol/L氯化钙凝血活酶溶液 3、正常对照血浆、受检血浆 三、操作 （一）APTT手工法（平皿法） 血浆0.05ml＋APTT试剂0.05ml +CaCl20.05ml （混匀计时） 结果观察：混匀后，不断挑动液体，发现细丝，停止计时 参考值 25～45s 37℃水浴 5min 37℃温浴 　APTT 延长 缩短 因子VIII、IX、XI活性减低 高凝状态 临床意义 肝素抗凝监测 （二）PT(半自动血凝仪法） 血浆0.05ml PT试剂0.1ml （37℃） 参考值 10～14s 37℃预温 3min 　PT 延长 缩短 因子II、V、VII、X、Fg活性减低 高凝状态 临床意义 口服双香豆素类抗凝药物监测 五、注意事项 1、标本的采集和处理，标本放置不应超过2h 2、收到后注意观察标本，分离血浆注意离心 速度和时间 3、操作要准确 4、使用试剂前应仔细阅读说明书 37℃试剂位 室温试剂孔 37℃加样器孔 37℃带搅拌试剂孔 室温加样器孔 联动加样枪 D-二聚体检测 一、原理（胶乳凝集法） 被检测血浆中加入标记D－二聚体单抗的胶乳颗粒悬液，如果血浆中D－二聚体含量大于0.5mg/L，与胶乳颗粒上的抗体结合，胶乳颗粒则发生凝集。 二、材料 绿色胶乳、样本稀释液、阴阳性对照、反应板、 待测血浆 病例：男性患者，26岁，因拔牙后出血不易止血七天 入院,患者于一周前在口腔医院行拔牙手术,术后出血较多,棉球压迫止血,稍有减轻,但创口一直渗血, PLT,BT,PT,APTT等检查均正常.患者平时无龈出血,鼻 出血,喀血,便血,血尿等,儿童时期曾有一次拔牙后不易止血和右踝关节扭伤后出现血肿病历,曾被怀疑为“轻型血友病”.因而被限制剧烈运动,避免外伤,手术.患者父亲曾有拔牙后十天多才止血。 其体格检查正常，实验室其他检查如因子活性等正常，其中FDP 6.4g/L(3.0g/L±0.82g/L)，D-二聚体阴性。 （一） APTT:手工法（平皿法） 血浆0.05ml＋APTT试剂0.05ml +CaCl20.05ml （混匀计时） 结果观察：混匀后，不断挑动液体，发现细丝， 停止计时 （二） PT:半自动血凝仪法 血浆0.05ml ＋ PT试剂0.1ml （37℃） 37℃水浴 5min 37℃温浴 37℃水浴 3min 四、注意事项 1.标本室温稳定4h，-20 ℃可长期保存，37 ℃快速复融。 2、加样量要精确，标本与胶乳等量。 3、胶乳试剂应放在4 ℃保存，勿冰冻，临用前恢复室温。 4、混匀胶乳试剂时，应旋转轻轻混匀，切勿剧烈振荡。 5、若标本已出现凝块，不能用于测定，否则出现假阳性反应。 三、操作 1、将试剂从4 ℃冰箱取出后恢复室温。 2、混匀胶乳，精确吸取20μL标本于反应板上 3、精确吸取20μL胶乳于反应板混匀，然后轻轻转动玻片，30秒至3分钟内观察结果有明显凝集者为阳性（同时做阴阳性对照）。 五、临床意义 1、深静脉血栓形成、心肌梗死、DIC等，其含量增高。 2、鉴别原发性纤溶症和继发性纤溶症。 FDP检测方法同D－二聚体检测 临床意义:升高：主要见于原发性纤溶亢进、高凝状态（手术后并发症、深静脉血栓、DIC等) * *