神经调节因子Neuregulin―1及其受体ErbB2、ErbB4在恒河猴大脑、小脑的表达及分布.docVIP

神经调节因子Neuregulin―1及其受体ErbB2、ErbB4在恒河猴大脑、小脑的表达及分布 　　[摘要] 目的 神经调节因子（Neuregulin-1， Nrg1）是类表皮样生长因子家族重要成员，本研究观察比较恒河猴大脑皮质、白质及小脑皮、白质Nrg1及其受体ErbB2、ErbB4表达及分布。 方法 使用苏木精-伊红（HE）染色观察恒河猴大脑及小脑皮质、白质基本结构形态。使用免疫荧光双标法检测恒河猴大脑及小脑皮质、白质中Nrg1及其受体ErbB2和ErbB4表达与分布。 结果 免疫荧光显示Nrg1可与其受体ErbB2或ErbB4共定位表达于恒河猴大脑皮质部分细胞中；而在大脑白质，仅Nrg1与ErbB4存在明显定位。在小脑皮质细胞以及白质中均可见Nrg1与ErbB2明显定位，而ErbB4荧光信号则不明显，且Nrg1与ErbB4无明显共定位。 结论 本研究提示Nrg1及其受体ErbB2、ErbB4在恒河猴大脑小脑皮质及白质中存在着差异性表达和共定位，以Nrg1/ErbB为基础的旁分泌或自分泌机制有可能参与高等动物脑功能活动。 　　[关键词] 恒河猴；大脑；小脑；神经分化因子-1；ErbB受体 　　[中图分类号] R-33 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）04（a）-0015-03 　　ErbB3和ErbB4受体可直接与Nrg1发生作用，作用形式包括同二聚体：ErbB3/ErbB3和ErbB4/ErbB4以及异二聚体形式：ErbB3/ErbB2和ErbB4/ErbB2[4]。Nrg1与其受体相互作用可激活ERK、AKT、MAPK， PI3γ、PKC 和Jak-STAT信号，进而引起细胞周期改变、细胞分化、抗凋亡程序启动和肿瘤形成[5-7]。在发育中的大鼠脑组织中，Nrg1的表达可见于灰质、下丘脑以及小脑。成年期，Nrg1则表达于更广泛的脑组织区域，包括下丘脑、海马、基底节以及脑干[7-8]。 Nrg1与其受体ErbB2，ErbB3和ErbB4二聚体复合物相互所用，参与了一系列生物学过程[9-12]。 有报道，Nrg1受体表达于下丘脑星形细胞，在Nrg1旁分泌作用下激活，分泌前列腺素E2，进而刺激黄体生成素释放激素（LHRH）的释放，参与性成熟[7-8]。新近研究发现，Nrg1可表达于垂体促性腺激素细胞，并以邻分泌方式激活泌乳素细胞表面受体磷酸化，促进泌乳素释放[10-12]。 体外条件下，Nrg1还可促进乳腺癌细胞的侵袭，通过自分泌或旁分泌方式调节肌动蛋白细胞骨架，促进癌细胞转移[13-14]。 　　Nrg1已用于恒河猴体内疾病模型研究，如心律失常诱导的心功能衰竭，且重组Nrg1可增加健康猕猴心脏体积[15-17]。Nrg1还可通过提高PKB和Bcl-xl活性来对抗恒河猴心脏衰竭过程中心动过速诱导的心肌细胞凋亡[16]。此外，Nrg1受体ErbB2，ErbB3及 ErbB4 mRNA表达可广泛见于青年及成年期恒河猴大脑组织[17]。本研究比较观察Nrg1及其受体ErbB2、ErbB4在成年期恒河猴大脑及小脑灰质、白质中表达与分布，从而促进对Nrg1/ErbB信号通路在大脑、小脑中功能的了解。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　小鼠抗Nrg1抗体购自美国Thermo Scientific公司，兔抗ErbB2及兔抗ErbB4抗体购自北京博奥森生物技术有限公司；抗小鼠DylightTM488及山羊抗兔DylighTMt594购自美国Jackson ImmunoResearch公司。DAPI染液及抗荧光衰减封片剂购自江苏碧云天生物技术研究所。苏木精及伊红染液购自北京中杉金桥生物技术有限公司。含有恒河猴大脑及小脑组织的组织芯片购自陕西超英生物技术有限公司。 　　1.2 HE染色 　　1.3 免疫荧光染色 　　2 结果 　　2.1 Nrg1及其受体ErbB2、ErbB4在恒河猴大脑皮质及白质中表达与分布 　　2.2 Nrg1及其受体ErbB4在恒河猴小脑皮质及白质中表达与分布 　　3 讨论 　　Nrg1/ErbB受体通路在器官发育、细胞分化以及肿瘤发生中具有重要作用。有报道， Nrg1参与下丘脑神经元胶质细胞间通讯，促进下丘脑LHRH释放，从而诱导大鼠垂体促性腺激素释放和正常性成熟[7]。以往研究发现重组Nrg1α可诱导垂体细胞ErbB3受体磷酸化以及ErbB3受体的内源性磷酸化激活[18]，提示Nrg1/ErbB受体通路可能是多种生理和病理条件下重要信号通路的起点，此外还发现Nrg1与其受体ErbB4可部分表达于恒河猴垂体前叶两邻近细胞中[11]，说明在高等动物垂体组织中存在以Nrg1及其受体信号通路为基础的旁分泌和邻分泌机制。因此，明确高等动物中Nrg1及其