实验十六血浆碳酸氢根浓度测定（滴定法）.doc

实验二十一 血浆碳酸氢根浓度测定 （滴定法） 【目的】 1.熟悉滴定法测定血浆碳酸氢根浓度的原理和方法。 2.掌握血浆碳酸氢根浓度测定的临床意义。 【原理】 血浆碳酸氢根浓度在一定程度上代表血浆对固定酸的缓冲能力，临床上也称为二氧化碳结合力（CO2-CP）或碱储。 在血浆或血清中加入过量的标准HCl溶液，使之于标本中的HCO3-反应，释放出CO2，再以标准NaOH溶液滴定其中剩余的盐酸，以酚红指示剂指示滴定终点。根据消耗NaOH的量，计算出血浆中HCO3-含量。反应如下： 酚红的变色范围　pH　6.8（黄）―――8.4（红） 【器材】 试管、试管架、吸管、滴定管。 【试剂】 1．0.02%酚红指示剂 取酚红0.1g，加10mmol/L 的NaOH溶液28.2ml，研磨至溶，然后加蒸馏水至50ml，取此液1份，以生理盐水9份稀释即得。 2．10mmol/L HCl溶液 必须准确校正。 3．10mmol/L NaOH溶液 必须准确校正。 4．154mmol/L NaCl溶液 （生理盐水 必须使pH 7）。 【操作】 取试管2支，按下表操作： 3-21 血浆碳酸氢根浓度测定操作步骤 加人物 m1 对照管 酚红指示剂 0.1 0.1 观察2支试管中颜色，如不相同或有变化应更换 血浆（血清） 0.1 - 10mmol/l盐酸 0.5 0.5 充分振摇1分钟，使CO2 充分逸出 生理盐水 2.4 2.5 混匀，用10mmol/L NaOH分别滴定两管至微红色（维持10～15秒钟不褪色）为终点，准确记录两管所消耗NaOH的毫升数（A表示测定管、B表示对照管）。正常时对照管氢氧化钠的消耗量应恰好为0.5ml，当超过0.5±0.01时，应重配10mmol/L氢氧化钠。 【计算】 【正常参考范围】 22～31mmol/L（50～70ml/dl）。 【临床意义】 1.碳酸氢根浓度升高见于： （1）代谢性碱中毒：如幽门梗阻、剧烈呕吐、库欣综合征、低血钾和服用过多的碱性药物等。 （2）呼吸性酸中毒：如呼吸中枢抑制、呼吸肌麻痹、肺气肿、支气管扩张和气胸等。 2.碳酸氢根浓度降低见于： （1）代谢性酸中毒：如严重腹泻、肾功能衰竭、糖尿病、肠瘘和使用过多的酸性药物等。 （2）呼吸性碱中毒：如癔病等所致的换气过度。 【结果及分析】 【思考题】 1. 为什么呼吸性酸中毒时血浆碳酸氢根浓度会升高？ 2. 滴定法测定碳酸氢根浓度依据的原理是什么？ 3. 为何要先加酚红指示剂，空试管中加入酚红后变红说明什么？ 1