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高效液相基线漂移（或上下波动）的原因 在实际工作中，我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移（或上下波动）的原因，可能有以下几种：1：柱子的平衡时间长。一般来说，新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。当然，柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂，那么比普通的简单的流动相（例如 二元流动相：甲醇：水，乙腈：水）2：系统存在漏点。如果系统存在漏点，那么出现基线向下漂移。需要检漏3：PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有气泡导致基线不稳，只需要看仪器的压力是否稳定就好。4：流动相脱气。如果流动相没有脱气，基线肯定是不稳的。5：柱后气泡。在柱子后有气泡产生，导致检测器中的读数有波动。6；PUMP密封不好。密封不好，也会导致PUMP头的气泡（好象不可能）和漏夜，基线当然不稳定了。7：系统的环境。仪器的使用，如温度的变化，流速的变化以及梯度洗脱，当然基线漂移。8：单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染，能造成流量不准确，压力 波动。故也会波动，漂移。9：检测器污染或有杂质 二：基线不平原因很多，可根据谱图的表现分析：一直上扬或下降型：柱环境平衡慢，pH不对，流动相酸挥发等，有时和梯度洗脱也相关；小幅缓慢波动（5-10min）：温度不稳；较大幅的波动：考虑流动相不均匀；很高很宽的峰：流通池有气泡或被污染；无规则上下波动：如果是旧柱子，考虑柱子污染，不容易冲平。检查出发点不外乎几点：柱子，流动相，柱温，检测器。可通过更换条件检查哪里出了问题，看你说的像是流动相的问题，你看看不用TBA，用同样洗脱强度的乙睛-水行不行。 效液相色谱基线不平 (2009-07-03 18:04:38) 转载 标签： 检测器 基线 高效液相色谱 1、柱温波动（即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。） 1、控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器图 2、流动相不均匀。（流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。） 2、使用HPLC级的溶剂，高纯度的盐和添加剂。流动相在使用前进行脱气，使用中使用氦气。 3、流通池被污染或有气体 3、用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用盐酸）?4、检测器出口阻塞。（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线）?4、取出阻塞物或更换管子。参考检测器手册更换流通池窗。 5、流动相配比不当或流速变化 5、更改配比或流速。为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。 6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 6、用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。 7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 7、检查流动相的组成。使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂 8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。 8、使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。?9、使用循环溶剂，但检测器未调整。 9、重新设定基线。当检测器动力学范围发生变化时，使用新的流动相。 10、检测器没有设定在最大吸收波长处。 10、将波长调整至最大吸收波长处 单糖和糖醇标样的分离 色谱柱: ZORBAX 糖分析柱 843300-908 4.6 x 150 mm, 5 μm 流动相: 75% 乙腈/25% 水 流速: 2 mL/min 柱温: 30oC 检测器: RID 检测器温度：30oC 样品: 鼠李糖、木糖、木糖醇、乳果糖、棉子糖 （各54 μg）、果糖(10 μg)、葡萄糖、蔗糖 （各36 μg） 麦芽糖、乳糖（各6 μg）、进样= 6.3 μL 鼠李糖、木糖、棉子糖（各54 μg），果糖 (10 μg)，葡萄糖、蔗糖（各36 μg），麦芽糖、 乳糖（各60 μg ），进样= 6.3 μL 样品：（各54 μg），进样= 6.3 μL 1.气泡(尖锐峰)? ? 流动相脱气,加柱后背压 epsh)5a* ?2.污染(随机噪声)? ? 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂 %|$h~ ?3.检测器灯连续噪声? ? 更换氘灯 V(
mz||* ?4.电干扰(偶然噪声)? ? 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等) luYkC@I@a ?5.检测器中有气泡? ? 流动相脱气,加柱后背压 高效液相色谱知识收藏 Agilent1100高压液相色谱仪基本操作步骤Agilent1100液相基本操作步骤 Agilent1100高压液相色谱仪维护