第9章3-化学键合相色法-极性键合相.ppt

第九章－3化学键合相色谱极性键合相色谱 一、概述 极性键合相(polar bonded phase)： 硅胶表面键合了极性有机基团的固定相。 常见的极性有机基团有氨基、二氨基、二甲氨基、氰基、醚基和二醇基等。 组成： 键型、主体基团、极性端基。 二、分离机理 作用力：主要靠范德华作用力的定向作用力、诱导作用力或氢键作用力。 例如：用氨基键合相分离极性化合物时，主要靠被分离组分的分子与键合相的氢键作用力的强弱差别而分离，如对糖类的分离等。若分离含有芳环等可诱导极化的非极性样品，则键合相与组分分子间的作用力，主要是诱导作用力。 三、分离模式 正相系统：同硅胶柱色谱，增加了正相色谱的类型 反相体系：甲醇、乙腈-水体系，洗脱顺序与反相键合相色谱刚好相反。又称为：含水正相色谱。　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　适用于分离分析极性很大的物质。 　优势：流动相简单 　不足：反相流动相条件下键合相不太稳定。 四、应用 氨基、氰基、芳硝基、二醇基、醚基键合相可用作正相色谱。它们主要以氢键力与溶质相互作用，其氢键力以下列顺序逐渐减弱： 氨基﹥氰基﹥芳硝基﹥二醇基﹥醚基 1、氨基键合相-碳水化合物柱 将氨丙硅烷基键合在载体硅胶上，制成氨基键合相。 色谱柱：艾杰尔公司promasil 氨基柱 250mm*4.6mm，粒径5μm 流速：1ml/分钟 柱温：25℃ 流动相：0.05M醋酸铵/乙腈（325/660）（重量比） 进样体积：100μl 波长：210nm（范围-0.002至0.02AU） 杂质1：苹果酸（分子量134） 杂质2：富马酸（分子量116） 杂质3：精氨酸（分子量174） 极性键合相测定三聚氰胺 LunaNH2氨基色谱 柱(250 mm×4·6 mm i·d·, 5μm),以90% (v/v)乙腈为流动相,流速1·0 ml/min 2、氰基键合相 氰基键合相是将氰乙硅烷基键合在硅胶上制成的。 离子对色谱 Shimadz C18(150*4.6mm)，流动相为乙腈一水(含20mM一戊烷磺酸钠，用磷酸调节州至2.1)(4:96)，210nm检测 极性柱 中国药科大学药物色谱分析课程 郑枫 * 药物色谱分析课程 中国药科大学药物分析教研室 * THANK YOU FOR YOUR ATTENTION! 兼有质子接受体和给予体的双重性能，具有强极性。它对具有较强氢键作用力的样品，显示强的分子间相互作用，而呈现大的k值。分离糖、氨基酸等极性大的物质 门冬氨酸鸟氨酸原料的有关物质检查 鸟氨酸 门冬氨酸 L-鸟氨酸 L-天门冬氨酸盐 福多斯坦示例 福多司坦 半胱氨酸 Kromasil 腈基柱（ 150*4.6mm)，甲醇：水＝８０:２０，质谱检测器 中国药科大学药物色谱分析课程 郑枫