第三章控制动物性别方案.ppt

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参考文献 楼允东等. 温度在水产动物性别控制中的作用[J].上海水产大学学报, 2008, 17(4). 王玉生等. 冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体[J].水产学报, 2014, 2. * * Haploid embryos are generated by mock-fertilizing eggs with UV-irradiated sperm (which cannot contribute genetically), and can survive a few days. Haploids can be rescued by suppressing formation of the polar body with pressure treatment shortly after fertilization. * 诱发二倍体雌核发育 减数雌核发育(Meiotic gynogenesis):抑制激活卵 (Activated egg)第二次成熟分裂后期的第二极体的形成和排出而产生二倍体的雌核发育。因为第一次减数分裂中有染色体的交换,而第二极体未被排出,该二倍体为杂合二倍体(Heterozygous)。 卵裂雌核发育(Mitotic gynogenesis):抑制激活卵第一次卵裂(有丝分裂)中、后期而产生二倍体的雌核发育。因为第二极体的排出,该二倍体为纯合二倍体(Homozygous)。 抑制第二极体外排 抑制第一次卵裂 精子遗传物质失活 * 人工诱发雌核发育二倍体的方法 物理方法:温度休克法、流体静水压法 静水压法诱发雌核发育的原理:施压时有丝分裂中的 纺锤丝崩解,由蛋白质组成的微管解凝,纺锤体及星光随 之消失,分裂受到抑制。压力解除后,蛋白质重新聚集, 纺锤丝形成,星光及纺锤体重新出现,分裂随之启动。 ---化学方法:如细胞松驰素B CB是一种可以抑制细胞分裂而不影响染色体复制和分离的真菌类代谢产物。 ---生物方法(远源杂交) 远源杂交诱发雌核发育的原理:异质种子穿入卵内, 精核不参与发育,但提供了雌核发育必需的双星光,使得 个体得以发育。 Heat-shock treatment to activated/fertilized eggs of Indian major carps to induce diploid gynogenesis/polyploidy respectively 热休克 * 三、雌核发育二倍体的鉴别 流式细胞仪检测法 荧光显微分析法 染色体分析法 同工酶电泳分析法 分子标记鉴定 1)天然雌核发育鱼类的鉴别(以天然雌核发育方正鲫为例) ---辐射精子人工繁殖 与遗传失活的鲤鱼精子人工受精,发育的胚胎不出现雌 核发育单倍体综合症,孵出的仔鱼正常而成活率高。 ---人工受精卵的细胞学观察 受精卵切片光镜观察,精子入卵后,精核不发育成雄性 原核,始终保持致密状态,此为典型雌核发育特征。 ---初泡期胚胎脑部形态观察 天然雌核发育及人工雌核发育二倍体脑部正常,人工雌 核发育单倍体胚胎脑部呈“S”型畸形。 ---红细胞大小:天然雌核发育以三倍体居多,体细胞和红细 胞核较二倍体大,红细胞核体积之比为1.5:1。 ---肝脏和肝细胞大小:方正鲫肝重为一般鲫的二倍。 ---体细胞计数:天然雌核发育方正鲫体细胞染色体属为150。 ---侧线鳞数目:三倍体鲫大于30,二倍体鲫小于30。 雌核发育二倍体生物的性别 雌核发育的个体或后裔的性别由卵核的遗传成分(染色体)决定。 在雌性配子同型(XX)的鱼类中,仅含有1条X染色体的卵子,经人工诱发的雌核发育二倍体个体含有XX染色体,遗传学上和表型上均为雌性。 在雌性配子异型(ZW)的鱼类中,则可产生雌雄两种性别(♀ZW和♂WW)。 雌核发育二倍体的生长与发育 天然雌核发育后裔的成活率很高;而人工诱发雌核发育后裔成活率低、生长慢。 天然雌核发育后裔卵巢能正常发育,可与雄鱼交配、产卵和繁殖;人工诱导雌核发育二倍体,一般卵巢较小、畸形,雌核发育后裔的能育性差。 雌核发育在水产养殖中的应用 性别控制——产生单性种群 快速建立纯系 确定性别遗传机制 基因-着丝点作图 有害隐性基因的排除 核质杂种 需要解决 两个问题 精子遗传 物质的失活 单倍体卵子 的二倍体化 辐射处理 温度休克和 静水压处理 大黄鱼精子 受精后的卵子 适宜剂量的 紫外线照射 用0—3℃的低温 海水或静水压处理 获得雌核发育 二倍体大黄鱼 其他方法 第四节 全雄鱼与全雌鱼 1.人工单性生殖 (1)雌核发育gynogenesis [d?in?d?enisis] (2)雄核发育androgenesis [?ndr?d?enisis] * 1.雌核发育:指精子虽

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