沃森《基因的分子生物学》与朱玉贤《现代分子生物学》要点合并讲解.doc

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沃森《基因的分子生物学》与朱玉贤《现代分子生物学》要点合并讲解

原核真核DNA结构1.双链,双螺旋(H键,碱基堆积力)2.碱基互补配对,含T3.碱基可以外翻进入E的催化部位4.多为右手螺旋,表面形成大小沟。大沟是Pro结合为点,有丰富化学信息,小沟无此作用5.加热,极端pH,有机溶剂处理可以变性,只留有一级结构,发生增色效应(吸收峰为260nm,1/2Max处温度为Tm),适当条件下复性。DNA为遗传物质实验1.肺炎双球杆菌转化实验:将灭火加热的S型菌与R菌共培养,注射入小鼠体内,小鼠死亡,并在其体内分离出有活性的S型菌,后又有实验证明S菌提取物亦有致病性,猜测菌中有转化子可以引起转化。Avery使用专一性E类分别降解DNA,pro,RNA,糖等,发现仅DNA被特异性处理的实验组无转化力2.T2噬菌体标记实验:Hershey分别用32P和35S标记秦代噬菌体的pro和核酸。感染E.coil并经历1-2个周期后,取大肠杆菌培养液高速离心,检测放射性发现:大部分的35S,32P分别位于上清液和底部沉淀。且子代噬菌体中检测出30%35P而不足1%32S。3.烟草TMV重建:TMV1与TMV2的RNA互换,感染烟草叶,发现病斑类型与RNA有关,与蛋白壳无关,说明RNA也是遗传物质(自设计实验:实验组--含抗卡那霉素的F因子转导入感态E.coil中,对照组加入不含致育因子的F因子,将对照组与实验组一起置于含卡那霉素的培养基中培养。结果实验组形成菌落,对照组则没有)DNA拓扑结构连环数=扭转数+缠绕数核小体引进负超螺旋拓扑异构E(I,II)RNA结构1.含U,单链2.易折叠成局部双螺旋,形成发夹,茎环,可G:U配对,不适合结合pro3.可形成复杂的三级结构4.可以使E类RNA功能1.在某些病毒中,RNA为遗传物质2.mRNA为基因到pro的媒介3.rRNA作为核糖体的一部分是pro合成场所4.tRNA是密码子与Aa间的适配器5.snRNA(小核RNA)是剪接体的一部分,介导mRNA的剪接6.sRNA(反义RNA)包括siRNA和miRNA,通过与mRNA序列互补参与基因沉默7.有些有E的作用,如RNaseP,介导tRNA剪接8.guideRNA:RNA编辑时指导U的插入与删除9.tmRNA:回收核糖体,除去由此产生的不完全pro10.scRNA(胞质容纳):如信号颗粒中7sRNA11.snoRNA(核仁小RNA):rRNA的甲基化修饰12.端粒RNA:真核端粒复制的模板染色体形状环状线状染色体特征1.结构稳定2.能自我复制3.指导pro合成4.可遗传染色体构成无核小体等结构可能有超螺旋DNA组pro核小体pro非组proHMGDNA结合pro+11bpDNA核小体核心2+2+2()1.8圈146bpDNA染色体压缩核小体—念珠状—染色质丝—突环—玫瑰花结—螺线圈—染色单体染色体调控核小体重塑(DNA滑动,从一个核小体DNA完整转移到另一个上)修饰增加肽链末端基团(组pro密码)核小体定位(被特殊的DNA结合pro或序列限定)甲基化:抑制或增强基因表达乙酰化:提高表达水平磷酸化:募集蛋白复合体到染色质(1和3共同增加DNA活性)基因组1.结构简练(仅有一个)2.转录产物多为多顺反子mRNA3.有重叠基因4.不与大量pro结合1.基因组庞大(有多个染色体)2.存在大量重复序列3.大部分为非编码序列,含断裂基因,有内含子4.与大量组pro,非组pro结合5.转录产物多为单顺反子mRNA6.存在大量顺式作用元件7.存在大量DNA多态性8.有端粒结构DNA序列1.不重复序列2.中度重复序列(rRNA,tRNA等的)3.高度重复序列(卫星DNA)复性动力学可以分类,与基因组复杂性呈正比。C值:单倍体基因组DNA的总量N值:单倍体基因组DNA的数目C值反常:真核生物中C值一般随着生物进化而增加,但某些两栖类的C值比哺乳类还大N值反常:真核生物中N值不与进化程度呈正比的现象基因密度:复杂度高的生物基因密度低复制比较1.遗传方式相同:均为半保留,半不连续复制2.都需要多种pro和E的协同参与,都涉及到拓扑异构E,解璇E,单链结合pro,引物合成E,DNA聚合E,连接E等3.都是从固定点开始以等速双向复制4.均合成RNA引物1.每条染色体仅一个起点2.可连续开始新的复制,一个复制单元可有多复制叉3.整个细胞周期均可进行4.起始点为OriC(大肠杆菌)5.叉速快6.聚合酶少,以III为主1.可有多个起点2.一轮结束前不能开始另一轮,一个复制单元单复制叉3.只在S期进行4.起始点为自主复制序列ARS(酵母)5.叉速慢6.聚合酶多,有-的切换复制分类环状双链:1.型:大肠杆菌,双向2.滚环形:噬菌体,单向3.D-环型:线、叶中,单向线性DNA:双向,-,复制叉处成眼状复制调控复制叉的多少1.周期水平:-期2.染色体水平:决定染

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