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一、酶的概念 酶是一类由活性细胞产生的具有催化作用和高度专一性的特殊蛋白质。简单说，酶是一类由活性细胞产生的生物催化剂。 辅基 全酶=酶蛋白+辅助因子 辅酶 斜面 半固体培养基（semisolid medium) 0.2～0.7％琼脂含量 用于：运动特征、分类鉴定、噬菌体效价滴定 液体培养基（liquid medium) 用于：大规模工业发酵、实验室基础理论和应用方面研究 3.按用途分：基础、加富、鉴别、选择、分析培养基等 基础培养基（minimum medium) 大多数微生物基本营养要求差不多。 基础培养基含一般微生物生长时所需的基本营养物质。 加富培养基（enrichment medium) 在基础培养基添加特殊营养物质，如：血清、动植物组织 液、酵母浸膏等。 用于培养苛刻的异养微生物及富集分离某种微生物。 与选择培养基区别： 加富培养基增加所要分离的微生物量，成为优势菌； 选择培养基是抑制不需要的微生物，所需要的为优势菌 鉴别培养基（differential medium) 加某种化学物质，发生特殊化学反应，产生特征变化， 如：明胶培养基鉴别是否产蛋白酶；远藤氏培养基加碱性复红和亚 硫酸钠，鉴别水中大肠菌群；H2S用于产H2S菌的鉴别；等 鉴别培养基（differential medium） 鉴别培养基（differential medium）的应用 选择培养基（selective medium) 将某种微生物从混合物中分离出，有利于需要菌生长，抑制不需要 的微生物。 利用微生物对各种化学物质敏感程度的差异,在培养基中加入染料、胆汁酸盐、金属盐类、酸、碱或抗生素中的一种，用以抑制非目的微生物的生长并使所要分离的微生物生长繁殖的培养基。 两类：根据某种微生物特殊营养需要设计的类型 如：以纤维素唯一碳源分离分解纤维素的菌 加某种化学物质，抑制其他微生物生长的类型 如：加10％酚抑制细菌、霉菌，分离放线菌；加结晶紫抑制G+， 分离G－菌；基因工程菌利用此特点，抗生素抗性筛选重组菌 选择培养基（selective medium) （4）其他 如：分析培养基（assay medium)分析某些化学物质的 浓度及微生物营养要求；还原培养基（reduced medium 培养厌氧菌；组织培养物培养基（tissue-culture medium)培养寄生微生物；等 五、营养物质进入微生物细胞的方式（跨膜运输） 微生物没有专门的摄食器官或细胞器（原生动物、微型后生动物除外）。各种营养物质需要通过细胞质膜而进入细胞。 营养物质各种各样，进入细胞的方式也不尽相同。 高浓到低浓，纯物理过程， 不耗能，无载体。 影响运输因素： 分子小、极性小、温度高、 速度快， 如：水、乙醇、甘油、一些气体分子、某些aa等。 1. 扩散(diffusion) 1. 扩散(diffusion) 亲水分子和憎水分子进出CM情况 亲水难以进入，憎水易进入 被动 不耗能 被运输物质结构不变化 不能逆浓 度剃度 需载体（carrier)，且载体专一性高 2.促进扩散（facilitated diffusion) 物质与载体亲和力在细胞内外不同，使该物质与载体可逆 结合分离达到物质运输目的。 影响因素：物质细胞内外浓度梯度及载体数量 载体蛋白跟酶性质类似，又称透过酶（permease） 物质主要是：氨基酸、单糖、维生素、无机盐 2.促进扩散（facilitated diffusion) 有时对同一物质运输由一种以上载体完成，如：鼠伤寒沙门氏菌四 种载体运输His；酿酒酵母三种载体运输G； 主要物质运输方式。 特点：耗能，可逆浓运输 能量来源：好氧和兼性直接利用呼吸能；厌氧化学能； 光合菌利用光能；嗜盐菌通过紫膜利用光能 种类：初级主动运输、次级主动运输、基团转位、 Na＋,K＋-ATPase系统、ATP偶联主动运输 3.主动运输（active transport） 3.主动运输（active transport） 钙离子泵与ATP偶联进行钙离子运输 Na＋,K＋-ATPase系统 1957年发现的，利用ATP将Na+由cell内泵出，将K+泵入。 3.主动运输（active transport） 基团转位（group translocation) 有复杂的运输系统完成物质运输，物质结构变化。 主要存在厌氧和兼性菌，主要用于糖、脂肪酸、核苷、碱基运输。 如：E.Coli对G吸收，通过磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）－磷